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龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP合酶β亚基基因克隆及其在龙眼体胚发生过程中的表达分析
引用本文:赖呈纯,赖钟雄,方智振,林玉玲,姜顺日.龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP合酶β亚基基因克隆及其在龙眼体胚发生过程中的表达分析[J].中国农业科学,2010,43(16):3392-3401.
作者姓名:赖呈纯  赖钟雄  方智振  林玉玲  姜顺日
作者单位:(福建农林大学园艺植物生物工程研究所);
基金项目:国家"十一五"科技支撑计划,福建省亚热带果树及特种经济作物种质资源共享平台,国家自然科学基金 
摘    要:【目的】克隆龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性愈伤组织线粒体ATP合酶β亚基基因(mitochondrial F1-ATPase beta subunit gene),并分析该基因在龙眼体胚发生过程中的表达情况。【方法】采用RT-PCR结合RACE法,通过T/A克隆测序,获得龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP合酶β亚基基因全长序列;随后通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法研究该基因在龙眼体胚发生过程中的表达规律。【结果】成功克隆龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP合酶β亚基基因完整cDNA序列(GenBank登录号:FJ222749),该序列全长2099bp,由1677bp核苷酸组成的ORF,编码558个氨基酸。该基因与其它植物的线粒体ATP合酶β亚基基因在核苷酸序列和推导的氨基酸序列方面相似性较高。对来源于动、植物的28条线粒体ATP合酶β亚基基因编码区序列所构建的进化树分析表明,由线粒体ATP合酶β亚基基因编码区序列所建立的系统关系树与真实的动、植物进化基本一致,龙眼处在双子叶植物中,由于该基因在龙眼同科属的植物中为首次克隆,所以有自己单独的分支。qRT-PCR结果分析表明,随着龙眼体胚的发育,线粒体ATP合酶β亚基基因转录水平逐渐升高,到球形胚阶段达到最高,而后又急剧下降,到鱼雷形胚阶段降到最低,子叶形胚阶段略有升高。【结论】龙眼线粒体ATP合酶β亚基基因与其它植物相应序列具有较高同源性,在龙眼体胚发育过程中,以球形胚阶段的表达最高。

关 键 词:龙眼  体细胞胚胎发生  线粒体ATP合酶β亚基基因  基因克隆  实时荧光定量PCR
收稿时间:2010-02-04;

Cloning of Mitochondrial F1-ATPase Beta Subunit Gene from Embryogenic Callus and Its Expression Analysis by qRT-PCR During Somatic Embryogenesis in Longan
LAI Cheng-chun,LAI Zhong-xiong,FANG Zhi-zhen,LIN Yu-ling,JIANG Shun-ri.Cloning of Mitochondrial F1-ATPase Beta Subunit Gene from Embryogenic Callus and Its Expression Analysis by qRT-PCR During Somatic Embryogenesis in Longan[J].Scientia Agricultura Sinica,2010,43(16):3392-3401.
Authors:LAI Cheng-chun  LAI Zhong-xiong  FANG Zhi-zhen  LIN Yu-ling  JIANG Shun-ri
Institution:(Institute of Horticultural Biotechnology, Fujian Agriculture and Forestry University)
Abstract:
Keywords:longan  somatic embryogenesis  mitochondrial F1-ATPase beta subunit gene  gene cloning  real-time PCR
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