湖北海棠病程相关蛋白MhPR8基因的克隆与表达

【目的】从湖北海棠叶片中克隆植物第Ⅲ类几丁质酶基因PR8的cDNA序列和基因组DNA序列，研究化学试剂SA、MeJA、ACC、ABA，非生物胁迫NaCl和低温（4℃），生物胁迫苹果轮纹病病原菌和苹果蚜虫诱导下MhPR8基因的表达特性。【方法】利用PCR技术分别从SA诱导的湖北海棠全长cDNA文库和基因组DNA中克隆MhPR8基因全长序列；利用生物信息学方法对其进行结构和功能的初步分析；利用实时荧光定量RT-PCR技术分析该基因的表达特性。【结果】该基因编码区为897 bp，编码298个氨基酸，蛋白质分子量为31.67 kD，等电点为4.77，命名为MhPR8。该基因在其编码区内部没有内含子。MhPR8蛋白含有保守的结构域GH18_hevamine_XipI_class_III，属于第III类几丁质酶。该蛋白含有6个保守的半胱氨基酸残基，含有植物第III类几丁质酶起催化作用的天冬氨酸和谷氨酸，分别位于第151和153位氨基酸。qRT-PCR分析结果表明，该基因在湖北海棠根中的表达量最大；SA、MeJA和ACC明显诱导该基因的表达，ABA略微诱导该基因的表达；低温诱导该基因的表达，而NaCl诱导该基因的表达不明显；生物胁迫苹果轮纹病病原菌和苹果蚜虫诱导该基因的表达。【结论】湖北海棠MhPR8可能参与SA、JA/ET介导的信号通路中，在湖北海棠抵抗生物胁迫和非生物胁迫中起着非常重要的作用。

Isolation and Expression of Pathogenesis-Related Protein Gene MhPR8 from Malus hupehensis