| 大豆孢囊线虫果胶酸裂解酶基因Hg-pel-5的克隆与分析 |
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| 引用本文： | 彭焕,彭德良,黄文坤,贺文婷,胡先奇.大豆孢囊线虫果胶酸裂解酶基因Hg-pel-5的克隆与分析[J].中国农业科学,2012,45(5):854-866. |
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| 作者姓名： | 彭焕 彭德良 黄文坤 贺文婷 胡先奇 |
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| 作者单位： | 1.云南农业大学农业生物多样性应用技术国家工程研究中心，昆明 650201;
2.中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室，北京 100193 |
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| 基金项目： | 国家公益性行业(农业)科研专项(200903040) |
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| 摘 要： | 【目的】克隆和分析与大豆孢囊线虫寄生密切相关的果胶酸裂解酶新基因，为研究大豆孢囊线虫寄生和致病的分子机理提供依据，并为探讨大豆孢囊线虫的防控新途径提供理论基础。【方法】通过EST分析结合RACE-PCR扩增方法，从大豆孢囊线虫中克隆出1个果胶酸裂解酶新基因；通过原位杂交和半定量PCR的方法确定基因的表达部位和分析不同发育阶段的基因表达；采用Southern杂交方法分析基因的拷贝数。【结果】 从大豆孢囊线虫中克隆出1个全长为957个碱基编码227个氨基酸残基的新果胶酸裂解酶基因Hg-pel-5（GenBank 登录号HQ123259）。Hg-pel-5 基因组由2个外显子和1个内含子组成。预测蛋白含有20个氨基酸残基的信号肽和4段细菌结构的果胶酸裂解酶第三家族的保守位点。原位杂交确定Hg-pel-5在大豆孢囊线虫亚腹食道腺中表达。半定量RT-PCR结果表明Hg-pel-5在寄生前和寄生过程早期的2龄幼虫大量表达。Southern杂交结果显示Hg-pel-5存在于大豆孢囊线虫基因组中并以多拷贝形式存在。【结论】对大豆孢囊线虫中1个新的果胶酸裂解酶基因Hg-pel-5进行克隆和分析，表明该基因在大豆孢囊线虫早期寄生过程中发挥重要作用。
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| 关 键 词： | 大豆孢囊线虫 果胶酸裂解酶 基因克隆 原位杂交 Southern 杂交 |
| 收稿时间： | 2011-11-03 |
Molecular Cloning and Analysis of a Novel Pectate Lyase Gene Hg-pel-5 from Soybean Cyst Nematode |
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| PENG Huan
,
PENG De-liang
,
HUANG Wen-kun
,
HE Wen-ting
,
HU Xian-qi.Molecular Cloning and Analysis of a Novel Pectate Lyase Gene Hg-pel-5 from Soybean Cyst Nematode[J].Scientia Agricultura Sinica,2012,45(5):854-866. |
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| Authors: | PENG Huan PENG De-liang HUANG Wen-kun HE Wen-ting HU Xian-qi |
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| Institution: | 1(1The National Engineering Research Center of Agribiodiversity Applied Technologies,Yunnan Agricultural University,Kunming 650201;2State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests,Institute of Plant Protection,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100193) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Heterodera glycines pectate lyase gene cloning in situ hybridization Southern blot |
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