| 稻曲病菌突变体B-726生物学性状分析及其T-DNA插入位点侧翼序列的克隆 |
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| 引用本文： | 黄磊,俞咪娜,胡建坤,于俊杰,尹小乐,聂亚锋,陈志谊,刘永锋.稻曲病菌突变体B-726生物学性状分析及其T-DNA插入位点侧翼序列的克隆[J].中国农业科学,2013,46(16):3344-3353. |
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| 作者姓名： | 黄磊 俞咪娜 胡建坤 于俊杰 尹小乐 聂亚锋 陈志谊 刘永锋 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31171802）、江苏省农业自主创新基金（CX（12）1003-10） |
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| 摘 要： | 【目的】分析稻曲病菌T-DNA插入突变体库中致病力减弱突变菌株B-726的生物学性状，分析其T-DNA插入位点的侧翼序列，克隆因外源基因插入被破坏正常表达的基因，为明确该基因在稻曲病菌致病过程中的作用奠定基础，并为稻曲病防治新途径的制定提供理论依据。【方法】通过测定突变菌株B-726生长速率、产孢能力及致病力检测，分析其生物学性状；Southern杂交分析B-726外源基因插入的拷贝数；利用HiTail-PCR 获得T-DNA插入位点的侧翼序列；运用RACE-PCR技术，克隆与插入位点毗邻的基因全长；用半定量RT-PCR分析该基因表达情况。【结果】突变菌株B-726与野生菌株P1相比致病力极显著下降，产孢能力、生长速率显著下降。Southern杂交结果显示T-DNA在菌株B-726中以单拷贝形式插入。经过序列分析发现，T-DNA插入在1个命名为Uvt-726上游344 bp处，半定量PCR结果表明，Uvt-726在B-726表达量较P1显著下降。【结论】克隆了1个可能与稻曲病菌致病力相关的基因，推断该基因在稻曲病菌致病过程中起着重要的作用。
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| 关 键 词： | 稻曲病菌 T-DNA插入突变 致病力 基因克隆 |
| 收稿时间： | 2013-02-04 |
Analysis of Biological Phenotypes and Molecular Cloning of T-DNA Integration Flanking Sequences of Ustilaginoidea virens Mutant Strain B-726 |
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| HUANG Lei,YU Mi-na,HU Jian-kun,YU Jun-jie,YIN Xiao-le,NIE Ya-feng,CHEN Zhi-yi,LIU Yong-feng.Analysis of Biological Phenotypes and Molecular Cloning of T-DNA Integration Flanking Sequences of Ustilaginoidea virens Mutant Strain B-726[J].Scientia Agricultura Sinica,2013,46(16):3344-3353. |
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| Authors: | HUANG Lei YU Mi-na HU Jian-kun YU Jun-jie YIN Xiao-le NIE Ya-feng CHEN Zhi-yi LIU Yong-feng |
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| Institution: | 1.Institute of Plant Protection, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014;
2.College of Life Science, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ustilaginoidea virens T-DNA insertion mutant pathogenicity gene clone |
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