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野生二粒小麦(Triticum dicoccoides)低分子量谷蛋白亚基基因的克隆与序列分析
引用本文:李巧云,安学丽,肖英华,张倩,张艳贞,夏先春,何中虎,晏月明.野生二粒小麦(Triticum dicoccoides)低分子量谷蛋白亚基基因的克隆与序列分析[J].中国农业科学,2007,40(3):457-463.
作者姓名:李巧云  安学丽  肖英华  张倩  张艳贞  夏先春  何中虎  晏月明
作者单位:1. 首都师范大学生命科学学院,北京,100037
2. 中国农业科学院作物科学研究所/国家小麦改良中心,北京,100081
3. 中国农业科学院作物科学研究所/国家小麦改良中心,北京,100081;CIMMYT中国办事处,北京,100081
基金项目:国家自然科学基金;引进国际先进农业科技计划(948计划)
摘    要: 【目的】旨在从野生二粒小麦中克隆新的低分子量谷蛋白亚基基因。【方法】首先通过SDS-PAGE方法对野生二粒小麦Y5和Y13的低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)进行鉴定,并利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)方法确定其精确分子量。然后采用AS-PCR方法,运用1对LMW-GS特异的引物,分别从Y5和Y13中扩增并克隆了2个亚基的编码基因(命名为LMW-Y5和LMW-Y13)。【结果】测序结果表明,所得基因均为完整的基因序列,包括上游区域、开放阅读框和下游区域,无内含子存在。由核酸序列所推导出的氨基酸序列表明,这两个基因的编码蛋白(命名为LMW-Y5和LMW-Y13)均属于LMW-i型亚基,分子量分别为38.9122 kD和31.8708 kD。其中LMW-Y5的分子量与质谱鉴定的分子量基本一致,表明该蛋白亚基没有翻译后修饰存在。但LMW-Y13的分子量与SDS-PAGE和质谱鉴定结果存在较大差异,其原因可能是在克隆过程中发生了重复区的碱基丢失。【结论】明确了野生二粒小麦两个LMW-i型亚基的分子结构特征,并讨论了LMW-i型亚基分子结构与品质的关系以及在小麦品质改良中的应用潜力。

关 键 词:野生二粒小麦  LMW-GS  AS-PCR  基因克隆
收稿时间:2005-12-12
修稿时间:2006-03-13

Cloning and Molecular Characterization of LMW Glutenin Subunit Genes in Triticum dicoccoides
LI Qiao-yun,AN Xue-li,XIAO Ying-hua,ZHANG Qian,ZHANG Yan-zhen,XIA Xian-chun,HE Zhong-hu,YAN Yue-ming.Cloning and Molecular Characterization of LMW Glutenin Subunit Genes in Triticum dicoccoides[J].Scientia Agricultura Sinica,2007,40(3):457-463.
Authors:LI Qiao-yun  AN Xue-li  XIAO Ying-hua  ZHANG Qian  ZHANG Yan-zhen  XIA Xian-chun  HE Zhong-hu  YAN Yue-ming
Institution:1.College of Life Science, Capital Normal University, Beijing 100037; 2.Crop Science Institute/National Wheat Improvement Center, Chinese Academy of Agriculture Sciences, Beijing 100081; 3. CIMMYT-China, C/O, CAAS, Beijing 100081
Abstract:
Keywords:LMW-GS  AS-PCR
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