| 西农萨能奶山羊脂肪酸合酶基因启动子的克隆及活性测定 |
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| 引用本文： | 张晓,罗军,李建华,赵旺生,王伟.西农萨能奶山羊脂肪酸合酶基因启动子的克隆及活性测定[J].中国农业科学,2010,43(3):640-647. |
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| 作者姓名： | 张晓 罗军 李建华 赵旺生 王伟 |
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| 作者单位： | （西北农林科技大学动物科技学院/陕西省农业分子生物学重点实验室）; |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，公益性行业(农业)科研专项经费项目 |
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| 摘 要： | 【目的】克隆测定西农萨能奶山羊脂肪酸合酶基因(fatty acid synthase,FAS)启动子的全长序列,进行活性区域分析,为奶山羊FAS基因功能和表达调控机理研究提供依据。【方法】根据牛和人脂肪酸合酶基因启动子的同源序列以及西农萨能奶山羊脂肪酸合酶基因5′UTR区域,分别设计上、下游引物,以西农萨能奶山羊全血DNA为模板克隆启动子序列。依据生物信息学分析结果重设引物,将FAS启动子基因分段克隆并连接到荧光素酶表达载体PGL-3,与Psv-β-半乳糖苷酶对照载体共转染293、MCF-7细胞,进行荧光素酶活性检测和β-半乳糖苷酶的活性检测。【结果】FAS基因启动子序列全长2640bp,与牛、人FAS启动子序列同源性90%以上,包括数个潜在SP1、Ets、LSF等转录因子结合位点和CCAAT框、GC框。-1040—-340bp处可能包含启动子活性中心,通过启动子缺失片段试验将活性中心范围缩小至-721—-540bp之间。【结论】通过克隆FAS基因启动子区域,分析表明启动子前端存在负调控元件,找出了启动子最小活性中心。
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| 关 键 词： | 西农萨能奶山羊 FAS启动子 基因克隆 活性测定 |
| 收稿时间： | 2009-04-28; |
Cloning and Activity Determination of Fatty Acid Synthase (FAS) Gene Promoter of Xinong Saanen Dairy Goat |
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| ZHANG Xiao,LUO Jun,LI Jian-hua,ZHAO Wang-sheng,WANG Wei.Cloning and Activity Determination of Fatty Acid Synthase (FAS) Gene Promoter of Xinong Saanen Dairy Goat[J].Scientia Agricultura Sinica,2010,43(3):640-647. |
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| Authors: | ZHANG Xiao LUO Jun LI Jian-hua ZHAO Wang-sheng WANG Wei |
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| Institution: | ZHANG Xiao,LUO Jun,LI Jian-hua,ZHAO Wang-sheng,WANG Wei (College of Animal Science , Technology,Northwest A&F University/Shaanxi Key Laboratory of Molecular Biology for Agriculture,Yangling 712100,Shaanxi) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Xinong Saanen dairy goat FAS promoter gene cloning activity determination |
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