| 家蚕hsp24.3基因的克隆及功能研究 |
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| 引用本文： | 刘彬斌,柴春利,王先燕,黄飞飞,鲁成.家蚕hsp24.3基因的克隆及功能研究[J].中国农业科学,2008,41(12):4201-4208. |
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| 作者姓名： | 刘彬斌 柴春利 王先燕 黄飞飞 鲁成 |
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| 作者单位： | 西南大学生物技术学院蚕学与系统生物研究所，四川农业科学院蚕业研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目
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国家重点基础研究发展规划(973计划)
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国家科技攻关项目
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| 摘 要： | 【目的】对家蚕 hsp24.3基因（Bmhsp24.3）的功能进行研究，为选育抗逆境家蚕品种提供基础材料和理论依据。【方法】在对家蚕基因组进行生物信息学分析的基础上，对家蚕低分子量热激蛋白基因 Bmhsp24.3进行克隆，然后利用家蚕的芯片数据对 Bmhsp24.3基因在5龄第3天幼虫不同组织中的表达模式进行分析，并利用半定量 RT-PCR技术，分别对 Bmhsp24.3基因在正常情况下和热刺激条件下家蚕5龄幼虫不同发育时期（1～6 d）后部丝腺中的表达状况以及10个不同家蚕品种5龄第3天幼虫丝腺中的表达情况进行了检测;最后将 Bmhsp24.3基因进行原核表达，获得重组蛋白 rBmHSP24.3，并进一步对该重组蛋白的功能进行了体外验证。【结果】Bmhsp24.3基因的编码区（CDS）长度为633 bp，编码210个氨基酸，为单外显子基因;RT-PCR检测发现该基因在家蚕的体壁、脂肪体以及丝腺组织中有较高水平表达，在其它组织中的表达不明显;同对照相比，不同家蚕品种以及不同发育时期的5龄幼虫在热刺激后，其后部丝腺中的Bmhsp24.3基因的表达显著升高。经 Native-PAGE和 SDS-PAGE分析表明，在高温条件下，表达获得的重组蛋白rBmHSP24.3能与硫氰酸酶形成稳定的复合物，使底物蛋白免受热刺激胁迫而变性，从而起着分子伴侣的作用。【结论】重组蛋白 rBmHSP24.3在体外具有分子伴侣的功能，推测该蛋白在家蚕体内同样具有分子伴侣的功能，在家蚕的抗逆境适应过程中起重要作用。
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| 关 键 词： | 家蚕 低分子量热激蛋白（sHSP） 分子伴侣 |
| 收稿时间： | 2007-12-20 |
Cloning and Functional Study of Bombyx mori hsp24.3 Gene |
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| LIU Bin-bin,CHAI Chun-li,WANG Xian-yan,HUANG Fei-fei,LU Cheng.Cloning and Functional Study of Bombyx mori hsp24.3 Gene[J].Scientia Agricultura Sinica,2008,41(12):4201-4208. |
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| Authors: | LIU Bin-bin CHAI Chun-li WANG Xian-yan HUANG Fei-fei LU Cheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bombyx mori sHSPs Chaperone |
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