| 苹果异戊烯基转移酶基因家族(MdlPTs)的克隆与MdlPT5a功能分析 |
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| 引用本文： | 李皓,张文,赵旭勉,任雪芹,朱元娣.苹果异戊烯基转移酶基因家族(MdlPTs)的克隆与MdlPT5a功能分析[J].中国农业科学,2011,44(19). |
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| 作者姓名： | 李皓 张文 赵旭勉 任雪芹 朱元娣 |
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| 作者单位： | 中国农业大学果树系,北京,100193 |
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| 摘 要： | 目的]克隆苹果(Malus domestica Borkh.)异戊烯基转移酶(isopentenyltransferase,IPT)基因家族MdIPTs,分析MdIPT5a的生理功能,为深入研究MdIPTs在苹果细胞分裂素生物合成途径中的作用和基因的遗传转化提供理论依据.方法]以‘富士’苹果为试材,利用RACE和苹果基因组信息克隆MdIPTs;利用洋葱表皮和拟南芥原生质体的瞬时表达研究MdIPT5a的亚细胞定位；通过农杆菌介导法遗传转化‘W38’烟草(Nicotiana tabacum cv.Wisconsin 38)过量表达MdIPT5a,RT-PCR鉴定转基因烟草.结果]克隆了10个MdIPTs的cDNA 序列,其中7个编码细胞分裂素生物合成主要途径中的腺苷-IPTs,具有N端的保守结构域GxxGxGKS,T]序列,分别位于苹果第13、16、3、11、13、16、6号染色体上,命名为MdIPT1a、MdIPT1b、MdIPT3a、MdIPT3b、MdIPT5a、MdIPT5b和MdIPT7a,均无内含子,编码284-370个氨基酸.MdIPT5a-GFP融合蛋白定位于细胞质中,但不定位于质体内.过量表达MdIPT5a的转基因烟草组培苗生根困难、叶片和不定芽增多.结论]苹果中腺苷-异戊烯基转移酶基因具有成对高度同源现象,与苹果17条染色体起源于9条始祖染色体的同源起源学说相一致,MdIPT5a具有催化合成细胞分裂素的功能.
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| 关 键 词： | 苹果 细胞分裂素 异戊烯基转移酶 亚细胞定位 遗传转化 |
Molecular Cloning of Isopentenyl Transferases Genes Family in Malus domestica Borkh.and a Preliminary Functional Analysis of MdlPT5a |
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| LI Hao,ZHANG Wen,ZHAO Xu-mian,REN Xue-qin,ZHU Yuan-di.Molecular Cloning of Isopentenyl Transferases Genes Family in Malus domestica Borkh.and a Preliminary Functional Analysis of MdlPT5a[J].Scientia Agricultura Sinica,2011,44(19). |
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| Authors: | LI Hao ZHANG Wen ZHAO Xu-mian REN Xue-qin ZHU Yuan-di |
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