猪CatSperB和CatSperG基因的克隆、表达及生物信息学

【目的】揭示猪CatSperB和CatSperG基因的存在、蛋白的结构特征、进化关系及时空表达特性。【方法】利用电子和分子克隆技术鉴定猪CatSperB和CatSperG基因全长cDNA，并利用定性RT-PCR和荧光定量RT-PCR进行CatSperB和CatSperG基因的时空表达研究。【结果】①分别获得了3 508 bp CatSperB和3 715 bp CatSperG电子转录子，分别包含3 330和3 483 bp开放阅读框，并经TA克隆测序验证，其CDS序列与人、牛、马和狗等的CatSperB和CatSperG基因的序列相似性在80%以上；②CatSperB分子质量为125.79 kD，为稳定蛋白；CatSperG分子质量为133.40 kD，为不稳定蛋白；③CatSperB和CatSperG 都包含 7 个通道蛋白保守的跨膜结构域，CatSperG蛋白C端含一个超螺旋结构，而CatSperB蛋白无明显的超螺旋结构信号；猪CatSperB和CatSperG与牛、狗和马的CatSperB和CatSperG蛋白同源关系较近，与人和小鼠的同源关系较远；④RT-PCR分析表明，CatSperB和CatSperG基因主要在睾丸中表达，但CatSperB在其它组织也有表达信号；⑤CatSperB和CatSperG基因mRNA表达水平在猪性发育的重要阶段，精子发生（60日龄）、初情期（90日龄）和性成熟（150日龄）前后都有显著提高（P＜0.05）。【结论】获得了猪CatSperB和CatSperG基因的cDNA克隆及其一系列生物信息学参数，揭示了CatSperB和CatSperG蛋白含7个保守的跨膜结构域及不同物种间的进化关系，证实CatSperB和CatSperG基因主要在睾丸表达，且其mRNA表达变化与公猪的性发育相一致。

Cloning, Expression and Bioinformatics Analysis of Porcine CatSperB and CatSperG Genes