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| 人工雄性不育基因和恢复基因的克隆及构建研究 | |
| 引用本文： | 曹光诚,陈占宽.人工雄性不育基因和恢复基因的克隆及构建研究[J].中国农业科学,1996,29(3):20-26. |
| 作者姓名： | 曹光诚 陈占宽 |
| 作者单位： | 中国科学院遗传研究所，北京 100101 河南省农业科学院实验中心 |
| 摘 要： | 本文报道了用于获得人工雄性不育系的质粒pTABNBAR55和用于获得人工恢复系的质粒pTABSBAR23的构建。用PCR的方法从烟草（Nicotiana tabacum cv.Samsun）中扩增了花药绒毡层特异表达TA29基因上游-291～+12共303bp的片段，称作TA29启动子（简写作pTA29）；从解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）中扩增了一种RNA酶及其特异抑制剂基因barnase和barstar。DNA序列分析表明，pTA29和barstar片段均与已发表的序列完全一致，barnase片段在3′端和已见报道的两种序列都有一个碱基的差异，但由此推断的氨基酸序列是一致的，不影响其在植物中的表达。把TA29启动子分别与barnase和barstar基因连接起来构成两个嵌合基因pTA29-barnase和pTA29-barstar，在这两个嵌合基因的3′端加上了260bp的Nos终止子（Nos.ter）以增强其在植物中的表达。然后将一个2.0kb的完整除草剂抗性标记“bar cassettee”插在含有这两个基因的质粒上，作为转化和制种过程的筛选标记。若将
前者导入欲作杂交制种母本的植物中，可以获得雄性不育系；后者导入欲作父本的植物中，可获得恢复系。 |
| 关 键 词： | 人工雄性不育 育性恢复 烟草 TA29启动子 Barnase基因 Barstar基因 多聚酶链式反应（PCR） |
The Cloning and Construction Study of Artificial Sterile Gene and Restore Gene |
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| Abstract: | |
| Keywords: | Artificial male sterility Fertility-restore Nicotiana tabacum pTA29 Barnase gene Barstar gene Polymerase chain reaction(PCR) |
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