| 巴西橡胶树橡胶粒子蛋白质的16-BAC/SDS-PAGE双向电泳及质谱分析 |
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| 引用本文： | 代龙军,项秋兰,黎瑜,聂智毅,康桂娟,段翠芳,曾日中.巴西橡胶树橡胶粒子蛋白质的16-BAC/SDS-PAGE双向电泳及质谱分析[J].中国农业科学,2012,45(11):2328-2338. |
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| 作者姓名： | 代龙军 项秋兰 黎瑜 聂智毅 康桂娟 段翠芳 曾日中 |
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| 作者单位： | 中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地，海南儋州 571737 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，中央级公益性科研院所基本科研业务费项目 |
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| 摘 要： | 【目的】分析巴西橡胶树（Hevea Brasiliensis Müll.Arg.）橡胶粒子的蛋白质构成，探索未知的橡胶粒子蛋白质。【方法】采用16-BAC/SDS PAGE双向电泳分离橡胶粒子蛋白质，采用MALDI/TOF-TOF质谱技术进行蛋白质鉴定；此外，利用磺基异硫氰酸苯酯（SPITC）化学辅助质谱测序法进行肽段的从头测序，获得未知蛋白质肽段的氨基酸序列。通过搜索橡胶树胶乳转录组测序获得的EST数据库，获取已知部分氨基酸序列蛋白质的全序列，或通过部分肽段获取为未知蛋白质编码的EST序列。【结果】获得了橡胶粒子蛋白质的16-BAC/SDS-PAGE双向电泳图谱，鉴定了17个橡胶粒子蛋白质；获得1个小橡胶粒子蛋白（small rubber particle protein，SRPP）亚家族成员SRPP(gi|37622210)的完整氨基酸序列以及1个橡胶延伸因子（rubber elongation factor，REF）亚家族新成员(hbREF2)的C端87个氨基酸残基序列，此蛋白质的氨基酸序列与已知的REF(gi|38122474)具有高度的相似性。【结论】采用16-BAC/SDS-PAGE双向电泳有效地分离了橡胶粒子蛋白质，展现了橡胶粒子蛋白质的相对含量，研究结果表明构成橡胶粒子的主要蛋白质组分是REF和SRPP亚家族蛋白质。橡胶粒子的蛋白质组分的全面鉴定，将有助于揭示橡胶粒子的生物学功能。
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| 关 键 词： | 巴西橡胶树 橡胶粒子 蛋白质 16-BAC/SDS-PAGE双向电泳 质谱分析 |
| 收稿时间： | 2011-12-28 |
Rubber Particle Protein Analysis of Hevea brasiliensis by Two Dimensional 16-BAC/SDS-PAGE and Mass Spectrometry |
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| DAI Long-jun
,
XIANG Qiu-lan
,
LI Yu
,
NIE Zhi-yi
,
KANG Gui-juan
,
DUAN Cui-fang
,
ZENG Ri-zhong.Rubber Particle Protein Analysis of Hevea brasiliensis by Two Dimensional 16-BAC/SDS-PAGE and Mass Spectrometry[J].Scientia Agricultura Sinica,2012,45(11):2328-2338. |
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| Authors: | DAI Long-jun XIANG Qiu-lan LI Yu NIE Zhi-yi KANG Gui-juan DUAN Cui-fang ZENG Ri-zhong |
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| Institution: | (Rubber Research Institute,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences(CATAS)/Key Laboratory of Biology and Genetic Resources of Rubber Tree,Ministry of Agriculture/State Key Laboratory Incubation Base,Danzhou 571737,Hainan) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hevea brasiliensis rubber particle protein 16-BAC/SDS-PAGE two dimensional electrophoresis mass spectrometry |
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