| 大麦BAC文库三维混合池的构建与HvGW2筛选 |
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| 引用本文： | 郭刚刚,董国清,周进,达瓦顿珠,袁兴淼,张京.大麦BAC文库三维混合池的构建与HvGW2筛选[J].中国农业科学,2013,46(1):9-17. |
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| 作者姓名： | 郭刚刚 董国清 周进 达瓦顿珠 袁兴淼 张京 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院作物科学研究所/农业部作物种质资源与生物技术重点开放实验室/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程;武汉工业学院;西藏农牧科学院 |
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| 基金项目： | 国家“863”计划项目(2012AA101105-4);国家“十二五”科技支撑计划(2012BAD03B01-2);国家现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-05) |
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| 摘 要： | 【目的】从大麦BAC文库中快速筛选包含目的基因HvGW2的阳性BAC克隆。【方法】构建BAC文库三维混合池，设计2对HvGW2特异性引物，进行BAC文库筛选，对含有目的基因HvGW2的阳性BAC克隆进行测序，获得编码大麦GW2蛋白的基因组DNA序列，并与禾本科中的GW2进行同源进化分析。【结果】构建了大麦BAC文库的三维混合池160个，文库空载率为0.18%；筛选到含HvGW2的阳性BAC克隆3个，其中，BAC克隆196M02包含完整编码该基因的序列；HvGW2包含8个外显子和7个内含子，具有与其它植物GW2相似的结构特征和保守的功能结构域；同源进化分析结果显示，大麦与小麦的GW2蛋白同源性最高；序列分析发现，HvGW2第6内含子上包含2个不同类型的反转录转座子插入，从而使大麦比其它作物的GW2长度增加11.5 kb以上。【结论】通过构建三维混合池快速筛选包含目的基因的单个阳性BAC克隆，建立了大麦目标基因克隆的辅助平台；HvGW2基因组中位于内含子区的反转录转座子插入导致基因长度增加，可能是影响该基因转录水平的关键变异。
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| 关 键 词： | 大麦 BAC文库 三维混合池 HvGW2 粒重基因 |
| 收稿时间： | 2012-10-12 |
Three-Dimensional Pooling and HvGW2 Gene Screening of Barley (Hordeum vulgare L.) BAC Library |
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| GUO Gang-gang,DONG Guo-qing,ZHOU Jin,DAWAdunzhu,YUAN Xing-miao,ZHANG Jing.Three-Dimensional Pooling and HvGW2 Gene Screening of Barley (Hordeum vulgare L.) BAC Library[J].Scientia Agricultura Sinica,2013,46(1):9-17. |
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| Authors: | GUO Gang-gang DONG Guo-qing ZHOU Jin DAWAdunzhu YUAN Xing-miao ZHANG Jing |
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| Institution: | 1.Institute of Crop Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Crop Germplasm and Biotechnology, Ministry of Agriculture/National Key Facility for Crop Gene Resources and Genetic Improvement, Beijing 100081;
2.Wuhan Polytechnic University, Wuhan 430023;
3.Tibet Academy of Agricultural and Animal Husbandry Sciences, Lhasa 850032 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | barley BAC library three-dimensional pools HvGW2 grain weight gene |
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