| 亚洲棉（Gossypium arboreum L.）全生育期均一化全长cDNA文库的构建和鉴定 |
| |
| 引用本文： | 王玉荣,张雪妍,刘传亮,陈亚娟,李付广.亚洲棉（Gossypium arboreum L.）全生育期均一化全长cDNA文库的构建和鉴定[J].中国农业科学,2009,42(4):1158-1164. |
| |
| 作者姓名： | 王玉荣 张雪妍 刘传亮 陈亚娟 李付广 |
| |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院棉花研究所/农业部棉花遗传改良重点实验室,河南,安阳,455000;天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津,300457
2. 中国农业科学院棉花研究所/农业部棉花遗传改良重点实验室,河南,安阳,455000 |
| |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，引进国际先进农业科学技术计划(948计划) |
| |
| 摘 要： | 【目的】构建二倍体亚洲棉石系亚1号全生育期均一化全长cDNA文库，建立亚洲棉功能基因组学研究基础平台，发掘亚洲棉发育、抗逆等相关基因。【方法】取石系亚1号子叶期、苗期、蕾期、花铃期不同组织器官，提取总RNA并分离纯化mRNA，采用SMART技术反转录全长双链cDNA。用DSN（duplex-specific nuclease）法对全长双链cDNA进行均一化，均一化的cDNA连接到λZAPⅡ载体，包装蛋白包装后构建石系亚1号全生育期均一化全长cDNA文库。【结果】初级文库滴度4×106 pfu?ml-1，库容2×106个独立克隆，重组率大于95%，插入片段平均长度大于1.5 kb。随机挑取192个克隆进行EST（expressed sequence tags）测序，冗余度仅为3.49%。BLASTN比对结果显示：78.31%的EST为新EST。【结论】文库均一化效果良好，质量符合要求，可能包含大量新基因，是进行EST测序、发掘新基因等棉花功能基因组学的研究平台。
|
| 关 键 词： | 亚洲棉 全生育期 均一化 cDNA文库 EST |
| 收稿时间： | 2008-4-30 |
Construction and Characterization of Normalized Full-Length cDNA Library of Asian Cotton(Gossypium arboreum L.)in the Whole-Life Cycle |
| |
| WANG Yu-rong,ZHANG Xue-yan,LIU Chuan-liang,CHEN Ya-juan,LI Fu-guang.Construction and Characterization of Normalized Full-Length cDNA Library of Asian Cotton(Gossypium arboreum L.)in the Whole-Life Cycle[J].Scientia Agricultura Sinica,2009,42(4):1158-1164. |
| |
| Authors: | WANG Yu-rong ZHANG Xue-yan LIU Chuan-liang CHEN Ya-juan LI Fu-guang |
| |
| Institution: | Cotton Research Institute, Chinese Academy of Agriculture Sciences/Key Laboratory of Cotton Genetic Improvement,Ministry of Agriculture, Anyang |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | EST |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《中国农业科学》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中国农业科学》下载免费的PDF全文 |
|
