| 蜡梅花cDNA文库构建及其高频出现脂转移蛋白cDNA的表达 |
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| 引用本文： | 眭顺照,李名扬,蒋安,王洋,秦华,皮伟,任琛.蜡梅花cDNA文库构建及其高频出现脂转移蛋白cDNA的表达[J].中国农业科学,2007,40(3):644-648. |
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| 作者姓名： | 眭顺照 李名扬 蒋安 王洋 秦华 皮伟 任琛 |
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| 作者单位： | 西南大学园艺园林学院, 西南大学花卉研究所 |
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| 基金项目： | 重庆市自然科学基金;重庆市教委资助项目 |
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| 摘 要： | 【目的】构建蜡梅花cDNA文库，分析蜡梅脂转移蛋白基因的表达，为探索蜡梅冬季开花分子机理，分离克隆特色基因奠定基础。【方法】以蜡梅花器官为材料，用SMART cDNA Library Construction Kit 构建文库，RT-PCR分析基因表达。【结果】经测定原始文库滴度达到1.4×106 pfu/ml，扩增总文库滴度约为1010pfu/ml，重组率达到96%，插入片段在0.5 kb 以上，平均约1.1 kb，通过PCR 检测，从总文库中检测到了表达丰度不同的蜡梅PI、AP3和LTP基因的特异片段，说明所构建的文库覆盖度高、代表性强，LTP基因具有内含子，而总文库中扩增出的LTP基因不含内含子，说明所构建的cDNA文库无基因组DNA污染， LTP基因在蜡梅开花各个时期均表现较高的转录水平，与EST分析时高频率出现LTP序列的情况相符，证实所构建的文库能够反映蜡梅开花过程基因表达的基本情况。【结论】已获得高质量的蜡梅花cDNA文库，可以用于进一步的基因克隆或EST测序分析，这是首次正式报道蜡梅cDNA文库的构建。LTP基因在蜡梅开花过程中可能具有重要的生物学功能，为探索蜡梅冬季开花分子机理提供了线索。
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| 关 键 词： | 蜡梅 cDNA文库 脂转移蛋白基因 RT-PCR |
| 收稿时间： | 2006-3-22 |
| 修稿时间： | 2006-03-24 |
Construction of Chimonanthus praecox Flower cDNA Library and Expression Analysis of High-Abundancy cDNA of Lipid Transfer Protein (LTP) |
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| SUI Shun-zhao,LI Ming-yang,JIANG An,WANG Yang,QIN Hua,PI Wei,REN Chen.Construction of Chimonanthus praecox Flower cDNA Library and Expression Analysis of High-Abundancy cDNA of Lipid Transfer Protein (LTP)[J].Scientia Agricultura Sinica,2007,40(3):644-648. |
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| Authors: | SUI Shun-zhao LI Ming-yang JIANG An WANG Yang QIN Hua PI Wei REN Chen |
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| Institution: | College of Horticulture and Landscape, Institute of Ornamental Research, Southwest University, Chongqing 400716 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RT-PCR |
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