我国甘薯E病毒全基因组序列特征及荧光定量检测技术的建立 |
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引用本文: | 唐伟,张成玲,杨冬静,马居奎,陈晶伟,高方园,谢逸萍,孙厚俊.我国甘薯E病毒全基因组序列特征及荧光定量检测技术的建立[J].中国农业科学,2023(20):4010-4020. |
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作者姓名: | 唐伟 张成玲 杨冬静 马居奎 陈晶伟 高方园 谢逸萍 孙厚俊 |
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作者单位: | 江苏徐淮地区徐州农业科学研究所/中国农业科学院甘薯研究所/甘薯育种农业农村部重点实验室 |
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基金项目: | 国家甘薯产业技术体系(CARS-10); |
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摘 要: | 【目的】甘薯E病毒(sweet potato virus E,SPVE)是甘薯上新发现的一种病毒。本研究对我国甘薯E病毒江苏徐州分离物(SPVE-XZ)的全基因组序列进行测定,分析该病毒基因组序列特征,并建立针对SPVE的荧光定量(quantitative PCR,qPCR)检测技术,为监测SPVE发生分布、检测种薯种苗中SPVE带毒情况并及时防控该病毒提供理论依据和技术支持。【方法】采用small RNA深度测序,结合RT-PCR和RACE技术,获得SPVE-XZ的全基因组序列,利用MegAlign、MEGA11等软件对获得的全基因组序列进行序列比对、系统发育关系分析。设计SPVE荧光定量检测引物,并通过对退火温度及引物浓度的优化,建立针对SPVE的qPCR检测方法,测定其特异性和灵敏度,应用于江苏省和山东省田间甘薯样品的检测。【结果】除ploy(A)外,所获得的SPVE-XZ全基因组序列全长为10 919 nt,包含1个长为10 560 nt的开放阅读框(open reading frame,ORF),编码3 519 aa的多聚蛋白。5′非翻译区(5′untranslated re...
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关 键 词: | 甘薯 甘薯E病毒 全基因组 系统进化分析 qPCR检测 |
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