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新城疫病毒Ulster株血凝素-神经氨酸酶基因的克隆与鉴定
引用本文:刘伟忠,姜焱,吴艳涛,彭大新,张如宽,刘秀梵.新城疫病毒Ulster株血凝素-神经氨酸酶基因的克隆与鉴定[J].扬州大学学报(农业与生命科学版),1997(3).
作者姓名:刘伟忠  姜焱  吴艳涛  彭大新  张如宽  刘秀梵
作者单位:江苏农学院动物医学系
基金项目:江苏省自然科学基金,江苏省教委自然科学基金
摘    要:新城疫病毒Ulster株经SPF鸡胚增殖和超速离心纯化后,以酚-SDS法提取其基因组RNA,作为反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的模板。根据其已发表的F和HN基因核苷酸序列,合成一个长为30mer的寡核苷酸(位于F基因内)和一对分别长为28、30mer的寡核苷酸(位于HN基因两侧)分别作为反转录引物和PCR引物。扩增反应产物经琼脂糖凝胶电泳分析,出现一条长为1.93kb的特异性条带,与预期相符。并将此特异性条带克隆入质粒载体pGEM-3Zf(+)中,并经限制性核酸内切酶分析(REA)。RT-PCR和REA结果证实其为新城疫病毒Ulster株的血凝素-神经氨酸酶基因。

关 键 词:  病毒  基因  克隆  /酶切分析
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