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奶牛γ-干扰素基因克隆及其在大肠杆菌中表达
引用本文:许金俊,秦爱建,刘岳龙,金文杰,李瑞芳.奶牛γ-干扰素基因克隆及其在大肠杆菌中表达[J].扬州大学学报(农业与生命科学版),2003,24(1):5-9.
作者姓名:许金俊  秦爱建  刘岳龙  金文杰  李瑞芳
作者单位:扬州大学,畜牧兽医学院,动物医学系,江苏,扬州,225009
基金项目:江苏省“3 3 3”工程人才培养基金资助项目 ( 2 0 0 2 2 2 )
摘    要:根据奶牛γ干扰素 ( Bov IFN-γ)基因的 c DNA序列设计 1对引物 ,应用一步法逆转录聚合酶链式反应 ( RT-PCR)技术从奶牛脾淋巴细胞的总 RNA中扩增出特异性片段。将 RT-PCR产物克隆到 Pucm-T载体中 ,经过限制性酶切分析、测序证实扩增得到的 Bov IFN-γ基因序列正确。将该基因片段切下并克隆到大肠杆菌表达载体 PGEX-6P-1谷光甘肽 S 转移酶基因的下游 ,经 IPTG诱导后 ,表达出 42 ku的融合蛋白 ,薄层扫描测定可溶性融合蛋白表达量约占菌体可溶性总蛋白的 2 5 %。通过细胞病变抑制试验证实 ,融合蛋白具有较好的生物学活性 ,在牛肾细胞上抑制水泡性口炎病毒的活性可达到 1 63 84U· mg- 1 ,有望成为预防和控制奶牛疾病的新产品。

关 键 词:奶牛  基因克隆  大肠杆菌  基因表达  γ-干扰素基因
文章编号:1671-4652(2002)04-0005-05
修稿时间:2002年8月16日

CLONING AND EXPRESSION OF BOVINE INTERFERON-GAMMA GENE IN ESCHERICHIA COLI
XU Jin jun,QIN Ai jian,LIU Yue long,JIN Wen jie,LI Rui fang.CLONING AND EXPRESSION OF BOVINE INTERFERON-GAMMA GENE IN ESCHERICHIA COLI[J].Journal of Yangzhou University:Agricultural and Life Science Edition,2003,24(1):5-9.
Authors:XU Jin jun  QIN Ai jian  LIU Yue long  JIN Wen jie  LI Rui fang
Abstract:
Keywords:bovine  interferon  gamma gene  lymphocyte  clone  expression
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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