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利用小鼠模型的脲酶免疫刺激物效果评价
引用本文:章玉涛,王加启,赵圣国,胡小丽,卜登攀,周凌云.利用小鼠模型的脲酶免疫刺激物效果评价[J].中国农业大学学报,2011,16(3):107-111.
作者姓名:章玉涛  王加启  赵圣国  胡小丽  卜登攀  周凌云
作者单位:1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/动物营养学国家重点实验室,北京,100193;甘肃农业大学动物科技学院,兰州,730070
2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/动物营养学国家重点实验室,北京,100193
基金项目:北京市自然科学基金资助项目(6092017)
摘    要:建立小鼠模型对制备的脲酶免疫刺激物进行免疫效果及其安全性评价。利用IPTG诱导脲酶基因克隆菌,大量表达脲酶UreB蛋白,用SDS-PAGE及Bradford方法对表达产物进行定性和定量分析;将脲酶UreB蛋白与弗氏(不)完全佐剂混合并乳化,制备成脲酶免疫刺激物。选择健康昆明小白鼠40只,随机分为4组,分别注射脲酶免疫刺激物、弗氏(不)完全佐剂和生理盐水,同时设置非注射为空白对照。利用间接ELISA测定特异性抗体效价,利用血常规分析仪和流式细胞仪测定小鼠血常规。结果表明:构建克隆菌株可以大量表达脲酶B蛋白,质量浓度为0.39 mg/mL。小鼠血清中特异性IgG抗体效价能达到1∶10 000以上,显著高于其他3个对照组(P<0.05),而特异性抗体IgA和IgM效价与对照组比较差异不显著(P>0.05)。脲酶免疫刺激物能显著提高小鼠血中白细胞、淋巴细胞和中间细胞数及比例(P<0.05),而对血液其他指标没有显著影响(P>0.05)。本试验成功制备脲酶免疫刺激物,并能有效刺激机体免疫应答,为后期奶牛免疫试验打下基础。

关 键 词:小鼠  脲酶  免疫刺激物  抗体效价  
收稿时间:2010/10/25 0:00:00

Evaluateion of the effect of urease immunostimulantsby using a murine model
ZHANG Yu-tao,WANG Jia-qi,ZHAO Sheng-guo,HU xiao-li,BU Deng-pan and ZHOU ling-yun.Evaluateion of the effect of urease immunostimulantsby using a murine model[J].Journal of China Agricultural University,2011,16(3):107-111.
Authors:ZHANG Yu-tao  WANG Jia-qi  ZHAO Sheng-guo  HU xiao-li  BU Deng-pan and ZHOU ling-yun
Institution:ZHANG Yu-tao1,2,WANG Jia-qi1,ZHAO Sheng-guo1,HU xiao-li1,BU Deng-pan1,ZHOU ling-yun1(1.State Key Laboratory of Animal Nutrition/Institute of Animal Science,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100193,China,2.College of Animal Science and Technology,Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,China)
Abstract:The object of this study is to prepare and evaluate the urease immunostimulants.The protein concentration was identified and quantified identified by SDS-PAGE and Bradford respectively after UreB was expressed.To prepare urease immunostimulants,UreB protein and Freund's complete(incomplete) adjuvant were mixed and emulsified.Forty healthy mice were randomly allocated to four groups,where three groups were immunized with urease immunostimulants,Freund's complete(incomplete) adjuvant and physiological saline....
Keywords:mice  urease  immunostimulants  antibody titer  
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