| 基于cry1Ac表达调控元件的苏云金芽孢杆菌表达载体构建 |
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| 引用本文： | 郑文,叶伟星,彭东海,孙明.基于cry1Ac表达调控元件的苏云金芽孢杆菌表达载体构建[J].湖北农业科学,2012(2):400-405. |
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| 作者姓名： | 郑文 叶伟星 彭东海 孙明 |
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| 作者单位： | 华中农业大学生命科学技术学院/农业微生物国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划项目(2009CB118902);国家高技术研究发展计划项目(2011AA10A230) |
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| 摘 要： | 通过克隆cry1Ac基因BtI-BtII启动子、SD序列以及终止子,并引入pET28a的His标签和多克隆位点,在穿梭载体pHT304的基础上构建了一个苏云金芽孢杆菌表达载体pBMB1A。将cry1Ac以及具有非典型BtI-BtII启动子的cry2Ab、cry5Ba、cry6Aa、cry7Ba、cry55Aa 6个基因装载到该表达载体上,转入BMB171构建了重组菌株,通过复红简单染色后的显微镜镜检结果表明,重组菌株BMB1A-1Ac、BMB1A-5Ba、BMB1A-7Ba和BMB1A-55Aa均能形成正常晶体,SDS-PAGE结果也证实这4个重组菌株的重组质粒均能表达出目的蛋白。同时,选取重组菌株BMB1A-1Ac来考察His标签对Cry1Ac杀虫活性的影响,生物活性测定结果显示重组菌株的LC50值与对照菌株相比无明显差异。该载体可用于快速克隆表达不同类别的Cry蛋白。
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| 关 键 词： | 苏云金芽孢杆菌 表达载体 cry基因 BtI-BtII启动子 |
Construction of Bacillus thuringiensis Expression Vector by Using Regulatory Elements from cry1Ac Gene |
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| ZHENG Wen,YE Wei-xing,PENG Dong-hai,SUN Ming.Construction of Bacillus thuringiensis Expression Vector by Using Regulatory Elements from cry1Ac Gene[J].Hubei Agricultural Sciences,2012(2):400-405. |
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| Authors: | ZHENG Wen YE Wei-xing PENG Dong-hai SUN Ming |
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| Institution: | (College of Life Science and Technology/State Key Laboratory of Agricultural Microbiology,Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bacillus thuringiensis expression vector cry gene BtI-BtII promoter |
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