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克氏原螯虾AFLP反应体系的建立
引用本文:杨帆,姚琪,刁英,郑兴飞,胡中立,舒新亚.克氏原螯虾AFLP反应体系的建立[J].湖北农业科学,2009,48(11).
作者姓名:杨帆  姚琪  刁英  郑兴飞  胡中立  舒新亚
作者单位:1. 重庆文理学院生命科学与技术学院,重庆,402168
2. 武汉理工大学资源与环境工程学院,武汉,430070
3. 重庆文理学院生命科学与技术学院,重庆402168;武汉大学生命科学学院,武汉430072
4. 武汉大学生命科学学院,武汉,430072
5. 湖北省水产科学研究所,武汉,430071
基金项目:国家科技支撑计划项目 
摘    要:以克氏原螯虾DNA为材料,对AFLP分析中的基因组酶切时间、选择性扩增中预扩增产物稀释倍数、Mg~(2+)浓度等3个因素进行了比较.结果表明,基因组用EcoR I和MseI双酶切5h,选择性扩增的PCR反应体系中Mg~(2+)1.5 mmol/L是进行克氏原螯虾AFLP分析的最佳反应条件,能够得到丰富稳定的带纹.而预扩增产物稀释倍数对选择性扩增没有明显影响.该体系的构建为AFLP技术在克氏原螯虾相关研究中的应用奠定了基础.

关 键 词:克氏原螯虾(Procambarus  clarkii)  反应体系

Establishment of AFLP Reaction System for Procambarus clarkii
YANG Fan,YAO Qi,DIAO Ying,ZHENG Xing-fei,HU Zhong-li,SHU Xin-ya.Establishment of AFLP Reaction System for Procambarus clarkii[J].Hubei Agricultural Sciences,2009,48(11).
Authors:YANG Fan  YAO Qi  DIAO Ying  ZHENG Xing-fei  HU Zhong-li  SHU Xin-ya
Abstract:By using genomic DNA of Procambarus clarkii, the time for DNA double enzymes digestion reaction,the dilution multiple for the pre-amplification production and the concentration of Mg~(2+ )in the selective amplification reactions system were analyzed. The results showed using 5h for double enzymes digestion and Mg~(2+) 1.5 mmol/L were the best for AFLP analysis of P. clarkii. And no change was found when adjusting the dilution multiple for the pre-amplification production. The establishment of the system might lay a foundation for the application of AFLP techniques to the relative research of P. clarkii.
Keywords:AFLP  Procambarus clarkii  AFLP  reaction system
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