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策略构建小黑杨茎形成层全长cDNA文库
引用本文:赵桂媛,魏志刚,刘关君,张凯旋,刘桂丰,杨传平.策略构建小黑杨茎形成层全长cDNA文库[J].北京林业大学学报,2010,32(1):52-56.
作者姓名:赵桂媛  魏志刚  刘关君  张凯旋  刘桂丰  杨传平
作者单位:东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室
基金项目:国家自然科学基金;黑龙江省重点攻关课题
摘    要:为了研究小黑杨木材形成过程中的关键基因,以2年生小黑杨茎形成层组织为试验材料提取RNA,采用SMART (RNA 转录过程中的5′末端转换机制) 技术合成cDNA第一链,通过LD-PCR合成双链cDNA。利用SfiⅠ限制性酶酶切后将其连接到质粒载体pDNR-LIB上,采用电穿孔法将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α中,构建全长cDNA文库。文库质量鉴定表明:原始文库滴度为2.18×106 pfu/mL,扩增后的文库滴度为5.46×109 pfu/mL,重组率为96%。插入片段长度在0.5~2.0 kb之间,平均长度为1.12 kb,表明构建的小黑杨茎形成层cDNA文库较为理想。 

关 键 词:小黑杨    形成层    SMART    cDNA文库
收稿时间:1900-01-01

Construction of full length cDNA library from stem cambium of Populus simonii ×P. nigra with SMART strategy
ZHAO Gui-yuan,WEI Zhi-gang,LIU Guan-jun,ZHANG Kai-xuan,LIU Gui-feng,YANG Chuan-ping..Construction of full length cDNA library from stem cambium of Populus simonii ×P. nigra with SMART strategy[J].Journal of Beijing Forestry University,2010,32(1):52-56.
Authors:ZHAO Gui-yuan  WEI Zhi-gang  LIU Guan-jun  ZHANG Kai-xuan  LIU Gui-feng  YANG Chuan-ping
Institution:Key Laboratory of Forest Tree Genetic Improvement and Biotechnology of Ministry of Education, Northeast Forestry University, Harbin, 150040, P. R. China.
Abstract:
Keywords:
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