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胡杨NAC转录因子PeNAC045基因的克隆及功能分析
引用本文:张晓菲,路信,段卉,练从龙,夏新莉,尹伟伦.胡杨NAC转录因子PeNAC045基因的克隆及功能分析[J].北京林业大学学报,2015,37(6):1-10.
作者姓名:张晓菲  路信  段卉  练从龙  夏新莉  尹伟伦
作者单位:北京林业大学林木育种国家工程实验室;北京林业大学林木育种国家工程实验室;北京林业大学林木育种国家工程实验室;北京林业大学林木育种国家工程实验室;北京林业大学林木育种国家工程实验室;北京林业大学林木育种国家工程实验室
基金项目:国家自然科学基金项目(31270656)、北京市科委项目(B13007)、北京市教委共建项目(科学研究与研究生培养共建项目)“北京市风景生态林树木高效水分利用分子调控机理研究”.
摘    要:NAC(NAM、ATAF1/2和CUC2)域蛋白是植物特有的最大的转录因子家族之一,在调节衰老,细胞分裂,木质形成,生物和非生物胁迫等方面发挥重要作用。本研究从胡杨中成功克隆出与胁迫相关的基因,并命名为PeNAC045。测序结果表明,PeNAC045基因编码区长度为915 bp,编码304个氨基酸,与毛果杨PtrNAC045的氨基酸一致性为96.05%。对PeNAC045基因在NaCl和干旱胁迫下的表达情况进行了分析,PeNAC045基因的表达受高盐和干旱的强烈诱导。利用PeNAC045的cDNA全长构建表达载体pBI121-PeNAC045-GFP,测序确认后,将重组结构和阳性对照(空载体)分别转化野生型拟南芥(Col-0),进行亚细胞定位观察,结果显示PeNAC045-GFP融合蛋白定位于细胞核上,并由DAPI进行核染色标定。利用农杆菌花序侵染法将构建的表达载体pCAMBIA1301-PeNAC045转化野生型拟南芥和突变体(ataf2),通过PCR鉴定,获得过表达植株及ataf2/PeNAC045回补株系。对各株系进行NaCl胁迫处理,分析PeNAC045基因的生物学功能。在150 mmol/L NaCl胁迫下,相比于拟南芥突变体和野生型植株,拟南芥PeNAC045过表达株系的萌发率降低,根长变短。此外,拟南芥PeNAC045过表达株系的株高明显低于其他株系,其在苗期对盐胁迫的敏感性增加。研究结果表明,在盐胁迫下,PeNAC045作为转录调节因子,负调控胁迫相关基因的表达。 

关 键 词:胡杨  PeNAC045  拟南芥  非生物胁迫  转基因  NaCl
收稿时间:2015-03-16

Cloning and functional analysis of PeNAC045 from Populus euphratica
Institution:National Engineering Laboratory for Tree Breeding, Beijing Forestry University, Beijing, 100083, P. R. China;
Abstract:
Keywords:Populus euphratica  PeNAC045  Arabidopsis thaliana  abiotic stress  transgenic  NaCl
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