油用向日葵FAD2-1基因RT-PCR体系的建立与优化 |
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引用本文: | 周菲,刘岩,黄绪堂,梁春波,王文军,李岑,郭永利.油用向日葵FAD2-1基因RT-PCR体系的建立与优化[J].黑龙江农业科学,2016(11):8-10. |
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作者姓名: | 周菲 刘岩 黄绪堂 梁春波 王文军 李岑 郭永利 |
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作者单位: | 黑龙江省农业科学院经济作物研究所 ,黑龙江哈尔滨,150086 |
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基金项目: | 黑龙江省农业科技创新工程资助项 目(2014 QN020),哈尔滨市科学技术局科技创新人才资助项目(2013 RFQYJ027),哈尔滨市科学技术局科技创新人才资助项目(2013RFQYJ034),国家向日葵现代产业技术体系资助项目(CARS-16) |
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摘 要: | 为了建立向日葵FAD2-1基因高效特异的PCR扩增体系,以油用向日葵86-1为材料提取总RNA,并反转录合成cDNA,以cDNA第一条链为模板对FAD2-1基因全长编码序列的PCR体系进行了优化。结果表明:根据已公布的FAD2-1序列设计3对特异性引物,每对引物设计了5个退火温度,筛选出适于该基因PCR扩增的引物及其退火温度,并将PCR扩增条件中循环数缩短为30次,延伸时间缩短为7min,此改进提高了PCR反应的效率。
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关 键 词: | 油用向日葵 FAD2-1 RT-PCR |
Establishment and Optimization of RT-PCR System for FAD2-1 in Oil Sunflower |
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