柽柳转录因子基因ThbZIP1的原核表达及重组蛋白纯化 |
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引用本文: | 刘胜男,刘志华,王玉成.柽柳转录因子基因ThbZIP1的原核表达及重组蛋白纯化[J].东北林业大学学报,2015(2):23-27. |
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作者姓名: | 刘胜男 刘志华 王玉成 |
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作者单位: | 林木遗传育种国家重点实验室 东北林业大学,哈尔滨,150040 |
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基金项目: | 哈尔滨市科技创新人才研究专项资金(2012RFXXN023)。 |
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摘 要: | 柽柳是重要的抗逆植物,提取柽柳总RNA,克隆了柽柳的16.5 k D b ZIP转录因子基因Thb ZIP1,构建原核表达载体p GEX-Thb ZIP1,导入宿主菌获得重组菌株BL21-Thb ZIP1,用异丙基-β-D-硫代半乳糖(IPTG)进行重组蛋白r Thb ZIP1诱导表达。试验结果表明:IPTG浓度为1.0 mmol/L,诱导温度为37℃条件下,诱导4 h,大肠杆菌提取液提取50 min时,所获得重组蛋白r Thb ZIP1表达量最大,占总蛋白的76.42%;经过10%SDS-PAGE电泳检测,发现重组蛋白r Thb ZIP1主要以包涵体的形式存在;并利用电纯化法成功获得纯化的目的蛋白。
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关 键 词: | 柽柳 bZIP1转录因子 原核表达 蛋白纯化 |
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