| 白桦ISSR-PCR反应体系的优化 |
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| 引用本文： | 杨传平,潘华,魏志刚,姜静.白桦ISSR-PCR反应体系的优化[J].东北林业大学学报,2005,33(6):1-3. |
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| 作者姓名： | 杨传平 潘华 魏志刚 姜静 |
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| 作者单位： | 东北林业大学,哈尔滨,150040 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;国家自然科学基金;中国科学院资助项目 |
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| 摘 要： | 以白桦基因组DNA为模板,研究了ISSR的影响因素,建立一套适宜于白桦的ISSR优化反应体系及程序。即20μL反应体系中,Mg2+浓度范围为0.5~3.0mmol·L-1,dNTPs浓度范围为0.10~0.30mmol·L-1,Taq聚合酶浓度范围为1.0~2.0U,模板DNA浓度为30~120ng,同时含有RNA的模板DNA对ISSR扩增也略有影响,引物浓度范围为0.2~0.4μmmol·L-1。通过梯度PCR测验,确定了适宜的退火温度为49℃。反应程序为:第一个循环基因组DNA经94℃预变性5min;30个循环为94℃变性30s,49℃退火30s,72℃延伸30s;最后一个循环完成后,在72℃延伸7min。
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| 关 键 词： | 白桦 ISSR标记 反应体系 |
| 文章编号： | 1001-117(2005)04-0164-02 |
| 收稿时间： | 2005-04-14 |
| 修稿时间： | 2005年1月26日 |
Optimization of ISSR - PCR Reaction System for Betula platyphylla Suk |
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| Yang Chuanping,Pan Hua,Wei Zhigang,Jiang Jing.Optimization of ISSR - PCR Reaction System for Betula platyphylla Suk[J].Journal of Northeast Forestry University,2005,33(6):1-3. |
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| Authors: | Yang Chuanping Pan Hua Wei Zhigang Jiang Jing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Betula platyphylla Suk ISSR markers Reaction system |
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