津田芜菁直根皮cDNA文库的构建及ESTs测序质量的分析 |
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引用本文: | 许志茹,李玉花,杨传平.津田芜菁直根皮cDNA文库的构建及ESTs测序质量的分析[J].东北林业大学学报,2005,33(2):18-19,37. |
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作者姓名: | 许志茹 李玉花 杨传平 |
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作者单位: | 东北林业大学,哈尔滨,150040;东北林业大学,哈尔滨,150040;东北林业大学,哈尔滨,150040 |
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摘 要: | 利用Trizol法从津田芜菁中提取总RNA,分离纯化富含Poly(A)+的mRNA,反转录合成双链cDNA,并以λ-ZAP为载体,构建了津田芜菁cDNA文库。以XL1-Blue为受体菌,测定原始文库的滴度为4. 3×106pfu/mL,重组率为96%,扩增后文库总滴度为6×1010pfu/mL。对随机提取的质粒进行PCR鉴定,表明插入片段大多分布在0. 5~2. 0kb之间。文库质量鉴定结果表明,构建的津田芜菁直根皮cDNA文库具有较好的库容量、较高的重组率以及较大的插入片段。对3 020个克隆的序列测定表明,获得可用序列2 718个,测序成功率为90%,首批共获得652个芜菁直根皮ESTs。
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关 键 词: | 芜菁 直根 cDNA 文库 EST 测序 |
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