| 番茄溃疡病菌LAMP快速检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 赵赛,李建嫄,周颖,杨文香,贵亚欣,张娜,刘大群.番茄溃疡病菌LAMP快速检测方法的建立[J].河北农业大学学报,2015(3). |
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| 作者姓名： | 赵赛 李建嫄 周颖 杨文香 贵亚欣 张娜 刘大群 |
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| 作者单位： | 河北农业大学 植物保护学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心/国家北方山区农业工程技术研究中心,河北 保定,071001 |
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| 基金项目： | 河北省科技成果转化项目(12820307D)；河北省教育厅青年基金(Q2012010，QN20131094)． |
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| 摘 要： | 以SYBR Green I为指示剂,建立了番茄溃疡病菌的环介导等温扩增可视化快速检测方法。根据番茄溃疡病菌特异的核糖体转录间隔区序列设计了4条引物进行LAMP扩增,通过对体系中各成分进行优化,最终确定25μL反应体系中模板200ng,MgSO4的适宜浓度为3.0mmol/L,Bst DNA聚合酶2U,dNTPs的适宜浓度为0.3mmol/L,外引物与内引物之比为1∶3时扩增效果较好,在65℃最佳反应时间为40min。在优化的体系条件下,获得的反应产物经SYBR Green I染色后,肉眼观察检测灵敏度可达到50CFU/mL,且对番茄溃疡病菌的检测具有高度的特异性。结果表明,该方法快速、准确、灵敏、特异,具有良好的实用性。
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| 关 键 词： | 番茄溃疡病菌 环介导等温扩增方法 快速检测 |
Development of a loop-mediated isothermal amplification assay for detection of Clavibactermichiganensis subsp .michiganensis |
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| ZHAO Sai,LI Ji an-yuan,ZHOU Ying,YANG Wen-xi ang,GUI Ya-xin,ZHANG Na,LIU Da-qun.Development of a loop-mediated isothermal amplification assay for detection of Clavibactermichiganensis subsp .michiganensis[J].Journal of Agricultural University of Hebei,2015(3). |
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| Authors: | ZHAO Sai LI Ji an-yuan ZHOU Ying YANG Wen-xi ang GUI Ya-xin ZHANG Na LIU Da-qun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Clavibacter michiganensis subsp michiganensis loop-mediated isothermal amplifi-cation rapid detection |
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