| 含MDV gB CTL表位与鸡HSP108融和蛋白基因的构建及原核表达 |
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| 引用本文： | 邱亚峰,葛菲菲,曹瑞兵.含MDV gB CTL表位与鸡HSP108融和蛋白基因的构建及原核表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2009,37(5):1-6. |
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| 作者姓名： | 邱亚峰 葛菲菲 曹瑞兵 |
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| 作者单位： | 邱亚峰,马志永,QIU Ya-feng,MA Zhi-yong(中国农业科学院,上海兽医研究所,兽医公共卫生研究室,上海,200232);葛菲菲,GE Fei-fei(上海市动物疫病预防控制中心,上海,201103);曹瑞兵,周斌,陈溥言,CAO Rui-bing,ZHOU Bin,CHEN Pu-yan(南京农业大学,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095)
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| 基金项目： | 人事部高层次留学人才回国资助项目 |
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| 摘 要： | 【目的】为新型马立克氏病(MD)疫苗的开发奠定基础。【方法】以SPF鸡肝脏中提取RNA为模板,利用RT-PCR反应扩增鸡HSP108基因;利用PCR方法扩增MDV gB CTL表位基因,并将MDV gB CTL表位基因与鸡HSP108融合在一起,构建融合蛋白基因rgBHSP108,将该融合蛋白基因克隆入原核表达载体pET-28a中,构建重组表达载体pET-gBHSP108,将该重组载体转化E.coliBL21(DE3),并用IPTG诱导融合蛋白rgBHSP108的表达,对rgBHSP108进行SDS-PAGE电泳、可溶性分析、蛋白纯化及Western-blot分析。【结果】扩增到鸡2.4kb的HSP108基因和330bp的MDV gB CTL表位基因;克隆的鸡HSP108基因序列与GenBank上发表的鸡输卵管HSP108(NM204289)和来源于肝脏HSP108(AF387865)核苷酸的同源性分别为99.7%和99.0%。rgBHSP108融合蛋白基因构建成功;融合蛋白rgBHSP108以包涵体的形式获得高效表达并纯化。Western-blot分析表明,针对MDV gB CTL表位的多抗可以与融合蛋白发生特异性反应。【结论】成功构建了鸡HSP108融合蛋白基因,利用原核表达系统成功表达rgBHSP108。
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| 关 键 词： | CTL表位 原核表达 融合蛋白基因 热休克蛋白 |
| 收稿时间： | 7/2/2008 12:00:00 AM |
Construction and prokaryotic expression of the fusion protein gene encoding MDV gB CTL epitope and chicken HSP108 |
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| QIU Ya-feng,GE Fei-fei,CAO Rui-bing,ZHOU Bin,MA Zhi-yong,CHEN Pu-yan.Construction and prokaryotic expression of the fusion protein gene encoding MDV gB CTL epitope and chicken HSP108[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2009,37(5):1-6. |
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| Authors: | QIU Ya-feng GE Fei-fei CAO Rui-bing ZHOU Bin MA Zhi-yong CHEN Pu-yan |
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| Institution: | 1 Department of Veterinary Public Health,Shanghai Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultrural Sciences,Shanghai 200232,China;2 Shanghai Animal Disease Control Center,Shanghai 201103,China;3 Key Laboratory of Animal Disease Diagnostic and Immunology,Ministry of Agriculture,Nanjing,Agricultural University,Nanjing,Jiangsu 210095,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CTL epitope prokaryotic expression fusiong protein gene heat shock protein |
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