| 中国南瓜内参基因18S rRNA的克隆及其引物开发 |
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| 引用本文： | 朱海生,王 彬,陈敏氡,等.中国南瓜内参基因18S rRNA的克隆及其引物开发[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2017,45(3):118-125. |
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| 作者姓名： | 朱海生 王 彬 陈敏氡 等 |
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| 作者单位： | 福建省农业科学院 作物研究所,蔬菜研究中心;福建省蔬菜工程技术研究中心,福建省农业科学院 作物研究所,蔬菜研究中心;福建省蔬菜工程技术研究中心,福建省农业科学院 作物研究所,蔬菜研究中心;福建省蔬菜工程技术研究中心 |
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| 基金项目： | 福建省属公益类科研院所基本科研专项（2015R1026-3）；福建省农业科学院创新团队PI项目（2016PI-40）；福建省自然科学基金项目(2015J01118) |
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| 摘 要： | 【目的】克隆获得中国南瓜18SrRNA,并设计合适的荧光定量PCR内参,为开展中国南瓜重要功能基因的表达模式和调控机制研究奠定基础。【方法】以中国南瓜‘密本’品种的基因组DNA为模板,通过PCR方法克隆中国南瓜18SrRNA基因序列,再利用Primer Premier软件设计荧光定量PCR引物,对该内参基因在中国南瓜不同组织、生长阶段及非生物胁迫条件下的表达稳定性进行检测。【结果】首次克隆得到中国南瓜18SrRNA基因序列,其长度为1 857bp,GenBank登录号为KM979454,该基因与西瓜、西葫芦等瓜类蔬菜18SrRNA基因同源性大都在90%以上;以中国南瓜内参基因18SrRNA核苷酸全长序列为基础设计1对荧光定量PCR引物,以中国南瓜果肉总RNA逆转录的cDNA第一链为模板进行PCR扩增,该引物扩增的片段大小为132bp,扩增效率高,特异性强;18SrRNA基因在中国南瓜不同组织、生长发育阶段及非生物胁迫条件下均能稳定表达。【结论】克隆获得中国南瓜18SrRNA基因,该基因适合在中国南瓜基因表达研究中作为内参基因。
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| 关 键 词： | 中国南瓜 18S rRNA 内参基因 实时荧光定量PCR |
| 收稿时间： | 2015/11/27 0:00:00 |
Cloning of 18S rRNA gene from Cucurbita moschata and development of its primers |
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| ZHU Haisheng,WANG Bin and CHEN Mindong,et al.Cloning of 18S rRNA gene from Cucurbita moschata and development of its primers[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2017,45(3):118-125. |
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| Authors: | ZHU Haisheng WANG Bin and CHEN Mindong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cucurbita moschata 18S rRNA reference gene real time PCR |
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