| 棉铃虫核型多角体病毒几丁质酶的原核表达及其协同增效作用 |
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| 引用本文： | 项林平,刘小芸,田强强.棉铃虫核型多角体病毒几丁质酶的原核表达及其协同增效作用[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2011,39(2):87-91. |
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| 作者姓名： | 项林平 刘小芸 田强强 |
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| 作者单位： | 植保资源与病虫害治理教育部重点实验室;植保资源与病虫害治理教育部重点实验室;西北农林科技大学 林学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30872033);教育部新世纪优秀人才支持计划项目（NCET-06-0867） |
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| 摘 要： | 【目的】在大肠杆菌中表达棉铃虫单粒包埋型核型多角体病毒(HearNPV)几丁质酶(Chi A),利用表达产物进行病毒增效作用研究,以明确杆状病毒Chi A对HearNPV的协同增效作用。【方法】用PCR方法扩增出不含N端信号肽编码序列的Chi A基因片段,分别克隆至原核表达载体pMAL-p2x和pET-32a中,构建重组表达载体,并分别在大肠杆菌TB1和BL21(DE3)中进行融合表达,测定融合蛋白对HearNPV的增效作用。【结果】克隆的基因片段经过测序后连接表达载体,成功构建了重组表达载体pMAL-p2x-Chi A和pET-32a-Chi A。重组载体转化相应菌株并进行诱导表达,发现pMAL-p2x-Chi A在大肠杆菌TB1中的表达量占细菌总蛋白的15.8%,其中20.0%为可溶性表达;pET-32a-Chi A在BL21(DE3)中的表达量占细菌总蛋白的26.8%,其中30.2%为可溶性表达。选用pET-32a-Chi A在BL21(DE3)中的表达产物作为增效蛋白,当表达的可溶性HearNPV Chi A的添加水平为1.0μg/mL时,其能够显著提高病毒毒力,棉铃虫的死亡率较对照提高36.6%。【结论】利用大肠杆菌表达的可溶性HearNPV Chi A,对HearNPV具有明显的增效作用。
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| 关 键 词： | 棉铃虫核型多角体病毒 几丁质酶 原核表达 增效作用 |
| 收稿时间： | 5/6/2010 12:00:00 AM |
Expression of HearNPV chitinase gene in E.coli and it enhancement on HearNPV virulence |
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| XIANG Lin-ping,LIU Xiao-yun,TIAN Qiang-qiang,LIU Qiang,Lü Ting-ting,WANG Dun.Expression of HearNPV chitinase gene in E.coli and it enhancement on HearNPV virulence[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2011,39(2):87-91. |
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| Authors: | XIANG Lin-ping LIU Xiao-yun TIAN Qiang-qiang LIU Qiang Lü Ting-ting WANG Dun |
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| Institution: | XIANG Lin-ping1,LIU Xiao-yun1,TIAN Qiang-qiang2,LIU Qiang2,Lü Ting-ting1,WANG Dun1 (1 Key Laboratory of Plant Protection Resources and Pest Management,Ministry of Education,Yangling,Shaanxi 712100,China,2 College of Forestry,Northwest A&F University,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HearNPV chitinase prokaryotic expression virulence enhancement |
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