| 金黄色葡萄球菌粘附素Fnbp A功能区基因的克隆和原核表达 |
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| 引用本文： | 杨宏军,高运东,王长法.金黄色葡萄球菌粘附素Fnbp A功能区基因的克隆和原核表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2008,36(1):54-58. |
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| 作者姓名： | 杨宏军 高运东 王长法 |
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| 作者单位： | 1. 山东省农业科学院,奶牛研究中心,山东,济南,250000;山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271018
2. 山东省农业科学院,奶牛研究中心,山东,济南,250000 |
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| 基金项目： | 教育部高校科技创新工程重大项目
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山东省"三О"工程项目
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山东省农科院高技术自主创新基金
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山东省农科院重大成果培育基金 |
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| 摘 要： | 【目的】克隆和表达奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌纤连蛋白连接蛋白A(Fnbp A)的功能基因。【方法】采集奶牛急性乳腺炎乳样,分离金黄色葡萄球菌,提取其DNA作为模板,利用设计合成的特异性引物,对金黄色葡萄球菌进行FnbpA功能基因的PCR扩增。回收目的基因并连接到T载体,鉴定后进行测序,然后将FnbpA基因连接到pET-32a(+)质粒中,经鉴定后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导后采用SDS-PAGE分析蛋白质的表达情况。【结果】PCR产物经电泳成像,仅金黄色葡萄球菌在1.7 kb处出现特异性条带,测序发现其与GenBank公布的FnbpA序列的同源性为98%;蛋白诱导表达SDS-PAGE分析发现,在80 ku处出现特异性条带。【结论】试验成功地克隆到FnbpA基因,并在大肠杆菌中获得高效表达,蛋白量为33.4%,为进一步研究金黄色葡萄球菌粘附素基因工程疫苗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 金黄色葡萄球菌 乳腺炎 粘附素 纤连蛋白连接蛋白A |
| 文章编号： | 1671-9387（2008）01-0054-05 |
| 收稿时间： | 2006-12-27 |
| 修稿时间： | 2006年12月27 |
Cloning and expression of the functional Fnbp A gene of Staphylococcus aureus adhesin |
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| LI Jun-ying,CHEN Hong,LAN Xian-yong,MIN Ling-jiang,LEI Chu-zhao,HU Shen-rong.Cloning and expression of the functional Fnbp A gene of Staphylococcus aureus adhesin[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2008,36(1):54-58. |
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| Authors: | LI Jun-ying CHEN Hong LAN Xian-yong MIN Ling-jiang LEI Chu-zhao HU Shen-rong |
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| Institution: | 1,2 (1 Milk Cow Research Center of Agricultural Science Academy of Shandong Province,Ji’nan,Shandong 250100,China;2 College of Animal Science and Technology,Shandong Agricultural University,Tai’an,Shandong 271018,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Staphylococcus aureus mastitis adhesin Fibronectin-binding protein A |
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