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加州鲈弹状病毒三水株全基因组序列测定及分析
引用本文:刘慧芳,张莉娟,李宁求,等.加州鲈弹状病毒三水株全基因组序列测定及分析[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2020,48(3):30-38.
作者姓名:刘慧芳  张莉娟  李宁求  
作者单位:中国水产科学研究院 珠江水产研究所,农业部渔用药物创制重点实验室,上海海洋大学 水产与生命学院,,上海海洋大学 水产与生命学院,,上海海洋大学 水产与生命学院,
基金项目:广东省促进经济发展专项资金(海洋经济发展用途)项目(GDME-20181007);广东省渔港建设和渔业产业发展专项(粤财农〔2017〕17号);广州市珠江科技新星项目(201710010087)
摘    要:【目的】对加州鲈弹状病毒弱毒三水株(MSRV-SS-7)及其母源株(MSRV-SS)进行全基因组克隆和测序分析。【方法】采用分段扩增方法对MSRV-SS-7及MSRV-SS基因组核心序列进行PCR扩增,第1轮根据鳜鱼弹状病毒(SCRV)基因序列(NC_008514.1)设计10对引物进行扩增并测序;在第1轮扩增产物测序、拼接基础上,设计8对引物进行第2轮扩增,拼接后获得基因组核心序列。同时用cDNA末端快速扩增法(RACE)获得3′和5′末端序列。采用Vector NTI 8.0对基因组核心序列和末端序列进行拼接,获得基因组全序列,使用Clone Manager 8.0对MSRV-SS-7和MSRV-SS进行序列比对分析;同时使用DNAMAN将基因组G基因序列转换为氨基酸序列,并通过MEGA 5.0与其他鱼类弹状病毒的G蛋白氨基酸序列进行进化树分析。【结果】MSRV-SS-7及其母源株MSRV-SS基因组全长均为11 548 bp,包含N、P、M、G、L等5个结构基因,基因组结构为3′Leader-N-P-M-G-L-Trailer 5′;MSRV-SS-7与MSRV-SS全基因组中共有10处核苷酸不同。G蛋白进化分析表明,MSRV-SS-7及母源株MSRV-SS与SCRV亲缘关系最近,且与鲈鱼弹状病毒属(Perhabdovirus)聚为一支。【结论】克隆分析了MSRV-SS-7的全基因组序列,可以用于后续活疫苗的开发。

关 键 词:鱼类弹状病毒  弱毒株  加州鲈  全基因组序列  G蛋白
收稿时间:2019/1/5 0:00:00

Genome sequencing and analysis of Sanshui strain of Micropterus salmoides rhabdovirus
LIU Huifang,ZHANG Lijuan and LI Ningqiu,et al.Genome sequencing and analysis of Sanshui strain of Micropterus salmoides rhabdovirus[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2020,48(3):30-38.
Authors:LIU Huifang  ZHANG Lijuan and LI Ningqiu  
Abstract:
Keywords:fish rhabdovirus  avirulent virus  Micropterus salmoides  genome sequence  G protein
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