| 字佐美曲霉E001菌株XynⅡ基因的克隆和融合表达 |
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| 引用本文： | 邬敏辰,周晨妍,李剑芳.字佐美曲霉E001菌株XynⅡ基因的克隆和融合表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2007,35(5):47-52. |
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| 作者姓名： | 邬敏辰 周晨妍 李剑芳 |
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| 作者单位： | [1]江南大学医学院,江苏无锡214122 [2]江南大学生物工程学院,江苏无锡214122 [3]江南大学食品学院,江苏无锡214122 |
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| 基金项目： | 江南大学校级科研项目（210000-52212052） |
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| 摘 要： | 以宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001株基因组DNA为模板,PCR扩增了编码木聚糖酶Ⅱ(Xyla-nases,XynⅡ)成熟肽的DNA片段。构建重组克隆质粒pUCm-T-XynⅡ,并以其为摸板,PCR扩增XynⅡ成熟肽的cDNA片段(555 bp),连接于表达质粒pGEX-5X-3的BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点间,构建重组表达质粒pGEX-5X-3-XynⅡ,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行检测。结果表明,XynⅡDNA中存在1个内含子,长度为51 bp;融合蛋白GST-XynⅡ主要以包涵体形式存在,相对分子质量约为50 ku,IPTG诱导1,3和5 h融合蛋白GST-XynⅡ的表达量分别约占菌体总蛋白量的12.6%,25.3%和32.1%。表明宇佐美曲霉E001菌株XynⅡ基因融合表达成功。
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| 关 键 词： | 宇佐美曲霉 木聚糖酶XynⅡ 基因克隆 融合表达 |
| 文章编号： | 1671-9387(2007)05-0047-06 |
| 收稿时间： | 2006/4/10 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2006-04-10 |
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