| 鸭源新城疫病毒RT-LAMP快速检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 鞠小军,刁有祥,唐 熠. 鸭源新城疫病毒RT-LAMP快速检测方法的建立[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2011, 39(12): 15-20 |
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| 作者姓名： | 鞠小军 刁有祥 唐 熠 |
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| 作者单位： | 山东农业大学 动物科技学院;山东农业大学 动物科技学院;山东农业大学 动物科技学院 |
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| 基金项目： | 现代农业产业技术体系建设专项 (nycytx-43-34)；公益性行业（农业）科研专项（201003012） |
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| 摘 要： | 【目的】建立鸭源新城疫病毒逆转录环介导等温核酸扩增(RT-LAMP)快速检测方法,为鸭源新城疫病毒的快速诊断提供支持。【方法】选取鸭源新城疫病毒NP基因的相对保守区序列,利用Primer Explorer V4在线软件设计了3对RT-LAMP引物,以鸭源新城疫病毒SDFCH株RNA为模板进行RT-LAMP反应,通过对反应温度、时间及反应体系各组分浓度的筛选,优化反应体系和反应条件,然后对该方法的灵敏性和特异性进行检测(以RT-PCR方法为对照),并将其应用于临床病料检测。【结果】优化的RT-LAMP反应体系能够在63℃下1h内实现目标核酸区段的大量扩增,反应结果可直接用肉眼判断;建立的鸭源新城疫病毒RT-LAMP检测方法特异性较强,灵敏度较高,与其他病毒,如H9N2亚型禽流感病毒(AIV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)、禽偏肺病毒(aMPV)、传染性支气管炎病毒(IBV)等的核酸无交叉反应,可检测到1×10-3稀释度的目标RNA(0.1pg/μL),较普通RT-PCR的灵敏性高10倍;利用建立的鸭源新城疫病毒RT-LAMP检测方法对24份疑似鸭源新城疫样品的阳性检出率为41.7%。【结论】建立的鸭源新城疫病毒的RT-LAMP检测方法,具有快速、准确、特异性强、灵敏度高的特点。
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| 关 键 词： | 鸭 新城疫病毒 逆转录环介导等温核酸扩增 快速检测 |
| 收稿时间： | 2011-05-31 |
Establishment of RT-LAMP system for rapid detection of Newcastle disease virus in duck |
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| JU Xiao-jun,DIAO You-xiang,TANG Yi,CHENG Yan-li,CHEN Lin,LI Jian-xia,SONG Xiao-na. Establishment of RT-LAMP system for rapid detection of Newcastle disease virus in duck[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2011, 39(12): 15-20 |
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| Authors: | JU Xiao-jun DIAO You-xiang TANG Yi CHENG Yan-li CHEN Lin LI Jian-xia SONG Xiao-na |
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| Affiliation: | JU Xiao-jun,DIAO You-xiang,TANG Yi,CHENG Yan-li,CHEN Lin,LI Jian-xia,SONG Xiao-na(College of Animal Science and Technology,Shandong Agricultural University,Tai'an,Shandong,271018,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | duck Newcastle disease virus RT-LAMP rapid detection |
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