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猪2型圆环病毒间接ELISA检测方法研究
引用本文:杨增坡,祝卫国,王旭荣.猪2型圆环病毒间接ELISA检测方法研究[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2006,34(5):1-5.
作者姓名:杨增坡  祝卫国  王旭荣
作者单位:西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100
摘    要:应用PCR扩增得到猪2型圆环病毒ORF2基因的3′端约600 bp,该PCV2 ORF2基因已去除终止子,并分别在其上下游添加Kpn Ⅰ和Hind Ⅲ酶切位点。PCR产物用Kpn Ⅰ和 Hind Ⅲ酶切后,与经同样处理过的 pBAD/g Ⅲ B Vector连接,转化TOP10细胞后挑取阳性克隆,经酶切鉴定和测序验证后用L-arabinose诱导进行融合表达,表达的蛋白主要以包涵体存在。经过镍离子亲和层析柱纯化,SDS-PAGE显示1条约28 ku的目的条带, 纯度达到85%以上。以该28 ku的多肽包被酶标板,建立了PCV2的间接ELISA检测方法。

关 键 词:猪圆环病毒  ORF2基因  大肠杆菌  表达  ELISA  检测
文章编号:1671-9387(2006)05-0001-05
收稿时间:2006-02-23
修稿时间:2006-02-23

Development of indirect ELISA for detecting PCV2 antibody
YANG Zeng-qi,ZHU Wei-guo,WANG Xu-rong,ZHANG Yong.Development of indirect ELISA for detecting PCV2 antibody[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2006,34(5):1-5.
Authors:YANG Zeng-qi  ZHU Wei-guo  WANG Xu-rong  ZHANG Yong
Institution:(Collage of Animal Science,Northwest A & F University,Yangling,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:ELISA
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