| H3N2亚型SIV核蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 朱春平,李 燕,吴亚丽,等.H3N2亚型SIV核蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2015,43(3):1-6. |
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| 作者姓名： | 朱春平 李 燕 吴亚丽 等 |
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| 作者单位： | 河南农业大学 牧医工程学院；中国兽医药品监察所,河南农业大学 牧医工程学院,河南农业大学 牧医工程学院 |
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| 基金项目： | 国家农业科技成果转化资金项目（2012GB2D000273）；河南省科技成果转化计划项目（122201110027） |
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| 摘 要： | 【目的】克隆和表达H3N2型猪流感病毒(SIV) A/swine/Henan/1/2010(H3N2)的核蛋白（NP）基因，为制备NP抗体和SIV基因工程疫苗奠定基础。【方法】提取SIV A/swine/Henan/1/2010(H3N2)的RNA，用RT-PCR扩增NP基因，将其定向克隆到pET-28a(+)原核表达载体，构建重组表达载体，并将其转化入大肠杆菌Rosetta中表达，用SDS-PAGE和Western blotting检测表达产物，同时考察IPTG不同浓度（0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 mmol/L）和不同诱导时间（2，4，6，8 h）对重组NP蛋白表达量的影响。【结果】克隆到1 512 bp的NP基因，与预期的核蛋白基因大小一致，共编码498个氨基酸；构建的重组表达载体在大肠杆菌Rosetta中表达出了分子质量约60 ku的重组核蛋白，其主要以包涵体的形式存在。IPTG不同诱导浓度和不同诱导时间对重组NP蛋白表达量的影响均较小。【结论】克隆和表达了H3N2亚型猪流感病毒的核蛋白基因。
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| 关 键 词： | 猪流感病毒 核蛋白 H3N2亚型 大肠杆菌 |
| 收稿时间： | 2013/11/4 0:00:00 |
Clone of nucleoprotein gene of influenza A virus (H3N2) and its expression in Escherichia coli |
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| ZHU Chun-ping,LI Yan and WU Ya-li,et al.Clone of nucleoprotein gene of influenza A virus (H3N2) and its expression in Escherichia coli[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2015,43(3):1-6. |
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| Authors: | ZHU Chun-ping LI Yan and WU Ya-li |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SIV nucleoprotein H3N2 Escherichia coli |
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