| 慢病毒活体介导精原干细胞生产转基因小鼠 |
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| 引用本文： | 辛 颖,张 涛,张优优,等.慢病毒活体介导精原干细胞生产转基因小鼠[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2014,42(6):15-20. |
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| 作者姓名： | 辛 颖 张 涛 张优优 等 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 动物科技学院;西北农林科技大学 动物科技学院；陕西理工学院 生物科学与工程学院;西北农林科技大学 动物科技学院 |
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| 基金项目： | 国家“973”计划项目“iPS猪的规模化高效创建”(K301021001)；国家自然科学基金项目“人工锌指转录激活因子激活猪体细胞内源多能因子诱导iPS细胞的研究”（K305021104） |
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| 摘 要： | 【目的】用慢病毒在体内感染精原干细胞,建立转基因动物生产技术平台。【方法】用三质粒慢病毒载体系统转染293T细胞包装慢病毒,转染后裂解细胞,收集携带绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒。将慢病毒液注射到小鼠曲细精管,获得F0代小鼠,制备小鼠睾丸组织切片,进行免疫双荧光检测。将F0代小鼠与野生型母鼠交配,获得F1代小鼠,PCR检测F1代是否为转基因小鼠。【结果】通过裂解细胞的方法成功制得慢病毒,将其注射到小鼠曲细精管,获得了10只F0代小鼠,经免疫双荧光检测,发现慢病毒可在活体上感染精原干细胞。8只F0代小鼠与野生型母鼠交配后共获得了41只F1代小鼠,经PCR检测,21只携带慢病毒基因片段,转基成功率为51.22%,表明慢病毒介导的基因改造是可遗传的。【结论】建立了一种操作简单、花费少、易于实施的慢病毒活体介导精原干细胞生产转基因小鼠的技术体系,该技术也可以推广到其他动物上,对于加速功能基因鉴定、疾病模型构建和家畜转基因育种等领域的研究有促进作用。
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| 关 键 词： | 慢病毒 活体 精原干细胞 转基因小鼠 |
| 收稿时间： | 2013/5/10 0:00:00 |
Production of transgenic mice by lentivirus mediated spermatogonial stem cells in vivo |
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| XIN Ying,ZHANG Tao and ZHANG You-you,et al.Production of transgenic mice by lentivirus mediated spermatogonial stem cells in vivo[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2014,42(6):15-20. |
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| Authors: | XIN Ying ZHANG Tao and ZHANG You-you |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | lentivirus in vivo spermatogonial stem cells transgenic mice |
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