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大豆查尔酮还原酶1基因的克隆及转化
引用本文:李 丹,吴 楠,郑成忠,等.大豆查尔酮还原酶1基因的克隆及转化[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2015,43(8):71-78.
作者姓名:李 丹  吴 楠  郑成忠  
作者单位:吉林农业大学 农学院,吉林农业大学 农学院,吉林农业大学 农学院
基金项目:国家自然科学基金面上项目“大豆查尔酮还原酶(CHR)在大豆苷元合成中的作用机理研究”(31771568)
摘    要:【目的】克隆大豆查尔酮还原酶1(CHR1)基因,以构建的过表达载体pCAMBIA3301-CHR1转化大豆,获得含有CHR1基因的阳性植株,为研究该基因的功能奠定基础。【方法】以大豆基因组DNA为模板,通过PCR扩增克隆CHR1基因,构建植物过表达载体pCAMBIA3301-CHR1,对其进行PCR及双酶切鉴定。采用农杆菌介导法将该载体转入大豆"吉农28"中,对转基因植株进行PCR、Southern杂交检测,对CHR1基因mRNA相对表达量进行荧光定量PCR检测。【结果】克隆得到的CHR1基因大小为1 100bp。成功构建了植物过表达载体pCAMBIA3301-CHR1,将其转化大豆后,通过PCR检测获得T1代转基因大豆植株12株;Southern杂交检测结果显示,CHR1基因以单拷贝形式整合入大豆基因组中;荧光定量PCR检测结果显示,转基因植株的CHR1mRNA相对表达量高于非转基因大豆植株。【结论】成功构建了过表达载体pCAMBIA3301-CHR1,并获得了CHR1基因表达量高的转基因大豆。

关 键 词:大豆查尔酮还原酶1基因  克隆  表达载体构建  农杆菌介导
收稿时间:1/8/2014 12:00:00 AM

Cloning and transformation of chalcone reductase 1 gene of soybean
LI Dan,WU Nan and ZHENG Cheng-zhong,et al.Cloning and transformation of chalcone reductase 1 gene of soybean[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2015,43(8):71-78.
Authors:LI Dan  WU Nan and ZHENG Cheng-zhong  
Abstract:
Keywords:
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