| 杜仲Fls基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 常 立,李周岐,李 煜,等.杜仲Fls基因的克隆及原核表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2014,42(4):102-108,116. |
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| 作者姓名： | 常 立 李周岐 李 煜 等 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 林学院;西北农林科技大学 林学院;西北农林科技大学 林学院 |
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| 基金项目： | 林业公益性行业科研专项“杜仲分子育种关键技术研究”（201204605） |
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| 摘 要： | 【目的】克隆杜仲黄酮醇合成酶基因(Fls)全长,对其开放阅读框(ORF)进行原核表达分析。【方法】以杜仲叶片为材料提取总RNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆杜仲Fls基因;Fls基因的ORF经限制性内切酶酶切,构建其原核表达载体pET-28a-Fls;最后利用IPTG诱导Fls基因在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。【结果】获得了黄酮醇合成酶基因全长序列,长度为1 220bp,ORF为1 011bp,编码336个氨基酸;成功构建了原核表达载体pET-28a-Fls;利用IPTG诱导Fls在BL21(DE3)中表达,SDS-PAGE电泳结果显示,在约44ku处有特异性的蛋白条带出现。【结论】获得了杜仲Fls基因的全长和ORF,并成功对其进行了原核表达。
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| 关 键 词： | 杜仲 基因克隆 Fls基因 原核表达 |
| 收稿时间： | 4/7/2013 12:00:00 AM |
Cloning and prokaryotic expression of Fls gene in Eucommia ulmoides Oliver |
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| CHANG Li,LI Zhou-qi and LI Yu,et al.Cloning and prokaryotic expression of Fls gene in Eucommia ulmoides Oliver[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2014,42(4):102-108,116. |
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| Authors: | CHANG Li LI Zhou-qi and LI Yu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Eucommia ulmoides Oliver gene cloning Fls gene prokaryotic expression |
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