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人表皮生长因子的基因克隆与原核表达
引用本文:王保莉,吴方丽,张 涌.人表皮生长因子的基因克隆与原核表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2004,32(2):83-85.
作者姓名:王保莉  吴方丽  张 涌
作者单位:1. 西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,生物工程研究所,陕西,杨凌,712100
2. 西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100
3. 西北农林科技大学,生物工程研究所,陕西,杨凌,712100
基金项目:国家"863"基金项目(2001AA213081);西北农林科技大学重点专题基金项目
摘    要:采用RT-PCR方法从人胎盘组织中扩增出hEGF基因,将其分别连入表达载体pGEX-4t-1(+)和pGEX-6p-1(+)质粒中,并转化入BL21-CodonplusTM中,解决了大肠杆菌密码子偏爱性问题,不需附加程序就可以编码稀有密码子的重组基因。SDS-PAGE结果证明,pGEX-4t-1(+)-hEGF和pGEX-6p-1(+)-hEGF分别在大肠杆菌BL21(DE3)-CodonplusTM-RP和BL21(DE3)-CodonplusTM-RIL中获得高效表达,目的蛋白占总菌体蛋白的30%左右。

关 键 词:人表皮生长因子  基因克隆  偏爱密码子  基因表达
文章编号:1671-9387(2004)02-0083-04
修稿时间:2003年7月25日

Gene cloning and expression of human epidermal growth factor
WANG Bao-li.Gene cloning and expression of human epidermal growth factor[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2004,32(2):83-85.
Authors:WANG Bao-li
Institution:WANG Bao-li~
Abstract:Human EGF gene was successfully amplified from human placenta with RT-PCR method,then cloned it into expression vector:pGEX-4t-1(+)and pGEX-6p-1(+) and shift them to BL_(21)(DE3) -Codon plus~(TM),which don't need added program to solve the coding of rare codons.pGEX-4t-1(+)-hEGF,pGEX-6p-1(+)-hEGFwas highly expressed in BL_(21)(DE3) -Codon plus~(TM) -RP,BL_(21)(DE3) -Codon plus~(TM) -RIL and the recombinant hEGF was ahout 30% of total protein measured with SDS-PAGE.
Keywords:hEGF  gene cloning  rare codons  gene expression
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