| 猪圆环病毒2型ORF2基因的原核表达 |
| |
| 引用本文： | 敬晓棋,吴发兴,丛丽媛.猪圆环病毒2型ORF2基因的原核表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2010,38(5):8-12. |
| |
| 作者姓名： | 敬晓棋 吴发兴 丛丽媛 |
| |
| 作者单位： | 西北农林科技大学动物医学院;榆林学院生命科学研究中心;中国动物卫生与流行病学中心动物流行病学监测室;陕西省教育学院生物系; |
| |
| 基金项目： | 陕西省科技攻关项目(2008K02-05-2) |
| |
| 摘 要： | 【目的】构建猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2原核表达质粒载体,高效重组表达PCV2壳蛋白Cap,为进一步建立PCV2 ELISA的检测方法及Cap蛋白单克隆抗体的制备研究奠定基础。【方法】根据猪圆环病毒2型ORF2基因序列设计带有BamHⅠ、HindⅢ酶切位点的引物,进行ORF2的PCR体外扩增。用扩增的ORF2基因构建pMD18-T-ORF2质粒,经测序检测正确后,与pET-32a(+)连接获得原核表达重组质粒pET-32a-ORF2。重组质粒pET-32a-ORF2转化BL21-ΔE3后用IPTG诱导表达,对获得的纯化表达产物进行了SDS-PAGE电泳、Western blot检测。【结果】PCR扩增得到了预期580 bp的目的基因,连接载体后经测序完全正确;pET-32a-ORF2在BL21-ΔE3得到高效表达,获得以包涵体形式存在的体外重组原核表达PCV2 Cap蛋白;Western blot检测结果表明,所得到的蛋白能够识别PCV2多克隆抗体。【结论】重组质粒pET-32a-ORF2在BL21-ΔE3高效表达重组PCV2 Cap蛋白,且具有免疫学生物活性。
|
| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 ORF2 原核表达 |
| 收稿时间： | 2009/11/2 0:00:00 |
Prokaryotic expression of ORF2 gene of porcine circovirus type 2 in E.coli system |
| |
| JING Xiao-qi,WU Fa-xing,CONG Li-yuan,ZHANG Pei-jun,CHEN De-kun.Prokaryotic expression of ORF2 gene of porcine circovirus type 2 in E.coli system[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2010,38(5):8-12. |
| |
| Authors: | JING Xiao-qi WU Fa-xing CONG Li-yuan ZHANG Pei-jun CHEN De-kun |
| |
| Institution: | JING Xiao-qi1,2,WU Fa-xing1,3,CONG Li-yuan1,ZHANG Pei-jun4,CHEN De-kun1(1 College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China,2 Life Science Research Center,Yulin University,Yulin,Shaanxi 719000,3 Laboratory of Animal Epidemiological Surveillance,China Animal Health , Epidemiology Center,Qingdao,Sh,ong,266032,4 Biology Department,Shaanxi Education College,Xi\'an,Shaanxi 710061,China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | porcine circovirus type 2 ORF2 procaryotic expression |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》下载免费的PDF全文 |
|
