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猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的制备与特性分析
引用本文:陈仕龙,林天龙,陈少莺.猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的制备与特性分析[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2008,36(8):46-50.
作者姓名:陈仕龙  林天龙  陈少莺
作者单位:1. 福建省农业科学院,畜牧兽医研究所,福建,福州,350013;福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建,福州,350013
2. 福建省农业科学院,生物技术研究所,福建,福州,350013;福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建,福州,350013
摘    要:【目的】制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的单克隆抗体,探讨单克隆抗体临床应用的价值及病毒蛋白的结构和功能。【方法】采用差速和蔗糖不连续密度梯度离心纯化的PRRSV抗原免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞常规融合,经间接ELISA的筛选和有限稀释亚克隆,获得能稳定分泌鼠抗PRRSV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并通过ELISA、Western blot和免疫荧光试验等方法分析其特性。【结果】成功地获得了3株稳定分泌抗PRRSV-GP5蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为A61、B47和C65。这3株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类分别为IgG1、IgG3和IgG1,均具有ELISA、IFA和Western blot特性,细胞上清液和腹水的ELISA抗体效价分别为1×27~1×28和1×105~1×106。特异性测定结果表明,3株单克隆抗体与Marc-145细胞、猪2型圆环病毒和猪细小病毒均无交叉反应。Western blot测定结果表明,3株单克隆抗体均能特异性识别PRRSV-GP5蛋白。【结论】获得了特异性识别PRRSV-GP5蛋白的单克隆抗体,为PRRS免疫诊断试剂盒的研制奠定了基础。

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒  单克隆抗体  酶联免疫吸附试验  免疫荧光试验  Westernblot
收稿时间:2007/7/23 0:00:00

Production and Characterization of Monoclonal Antibodies against Porcine reproductive and respiratory syndrome virus
CHEN Shi-long,a,LIN Tian-long,b,CHEN Shao-ying,a,ZHUANG Xiang-sheng,a,WANG Long-bai,a,WEI Hong,a,ZHOU Lun-jiang,a,CHE Yong-liang,a,HUANG Mei-qing.Production and Characterization of Monoclonal Antibodies against Porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2008,36(8):46-50.
Authors:CHEN Shi-long  a  LIN Tian-long  b  CHEN Shao-ying  a  ZHUANG Xiang-sheng  a  WANG Long-bai  a  WEI Hong  a  ZHOU Lun-jiang  a  CHE Yong-liang  a  HUANG Mei-qing
Institution:1a,2(1 a.Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine,b.Institute of Biotechnology,Fujian Academy of Agricultural Sciences,Fuzhou,Fujian 350013,China;2 Fujian Animal Diseases Control Technology Development Center,Fuzhou,Fujian 350013,China)
Abstract:
Keywords:
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