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aiiA基因原核表达载体的构建与表达
引用本文:欧阳乐军,梁卓玲,黄真池,等.aiiA基因原核表达载体的构建与表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2014,42(10):141-146.
作者姓名:欧阳乐军  梁卓玲  黄真池  
作者单位:湛江师范学院 生命科学与技术学院;湛江师范学院 生命科学与技术学院;湛江师范学院 生命科学与技术学院
基金项目:国家“星火”计划项目(2012GA780019,2011GA780057);广东高校边缘热带特色植物资源工程技术开发中心项目(GCZX-B1002);广东省科技计划项目(2012A020602108);广东省自然科学基金项目(S2013040014690,S2012010008737);湛江市科技攻关项目(2011C3104010)
摘    要:【目的】构建aiiA基因的原核表达载体,并进行诱导表达,检测aiiA蛋白的抗病性,为进一步通过转基因技术培育转aiiA基因植株奠定基础。【方法】从pMDTM19-T Vector+aiiA质粒中酶切获得aiiA基因,将其与pGEX-4T-1表达载体连接构建重组原核表达载体pGEX-4T-1+aiiA,经双酶切及测序鉴定后,进行诱导表达,并对表达产物的功能进行鉴定。【结果】双酶切与PCR检测结果表明,重组原核表达载体pGEX-4T-1+aiiA构建成功。表达条件优化结果表明,在25℃下用0.2mmol/L IPTG诱导9h,aiiA蛋白的表达量最高。aiiA重组蛋白抑菌试验结果表明,其能够降解细菌的AHLs信号分子,猝灭细菌的群体感应,明显减弱病菌的致病力。转aiiA基因尾巨桉抗性检测结果表明,转基因植株抗性明显增强,表现为发病时间延迟,病情指数降低,评价为中等抗病水平。【结论】成功构建了aiiA基因原核表达载体,其诱导表达产物能猝灭细菌的群体感应,明显减弱病菌的致病力。

关 键 词:群体感应  aiiA基因  N-酰基高丝氨酸内酯  N-酰基高丝氨酸内酯酶
收稿时间:7/2/2013 12:00:00 AM

Construction and expression of prokaryotic vector for aiiA gene
OUYANG Le-jun,LIANG Zuo-ling and HUANG Zhen-chi,et al.Construction and expression of prokaryotic vector for aiiA gene[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2014,42(10):141-146.
Authors:OUYANG Le-jun  LIANG Zuo-ling and HUANG Zhen-chi  
Abstract:
Keywords:quorum sensing  aiiA gene  N-acyl-homoserine lactones  N-acyl-homoserine enzymes
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