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4种小鼠肠上皮细胞分离培养方法的比较
引用本文:孙秀梅,程 帆,刘 维.4种小鼠肠上皮细胞分离培养方法的比较[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2013,41(5):25-31.
作者姓名:孙秀梅  程 帆  刘 维
作者单位:安徽农业大学 动物科技学院;安徽农业大学 茶与食品科技学院;安徽农业大学 茶与食品科技学院
基金项目:国家自然科学基金项目(31001019);安徽省自然科学基金项目(11040606M91)
摘    要:【目的】比较4种小鼠肠黏膜上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IECs)分离方法的分离效果,建立小鼠IECs的有效分离培养方法,获得小鼠IECs原代细胞,为后续研究做准备。【方法】分别采用组织块培养法、嗜热菌蛋白酶消化法、胶原酶Ⅺ和中性蛋白酶Ⅰ联合消化法以及胶原酶Ⅰ和中性蛋白酶Ⅵ联合消化法共4种方法分离小鼠IECs并培养,通过细胞免疫组织化学法和细胞免疫荧光法对分离的IECs进行细胞特异性鉴定,比较4种方法的分离效果。【结果】组织块培养法所获IECs活力好,增殖能力强,但成纤维细胞污染较严重,细胞纯度低;胶原酶Ⅰ和中性蛋白酶Ⅵ分离法获得的IECs数量少且细胞增殖能力弱;嗜热菌蛋白酶消化法及胶原酶Ⅺ与中性蛋白酶Ⅰ联合消化法所获得的小鼠IECs纯度较高,原代培养时增殖能力稍弱于组织块培养法,但传代后增殖能力趋于稳定。通过细胞免疫组织化学法和细胞免疫荧光法对分离的细胞进行鉴定,结果表明,分离的细胞多数为小鼠IECs。【结论】嗜热菌蛋白酶消化法及胶原酶Ⅺ与中性蛋白酶Ⅰ联合消化法均适合肠道上皮细胞的分离和培养。

关 键 词:小鼠  小肠上皮细胞  原代培养  组织块分离培养法  酶学分离培养法
收稿时间:2012/8/11 0:00:00

Comparison of four primary culture methods for mouse intestinal epithelial cells
SUN Xiu-meia,CHENG Fanb,LIU Weia,SUN Taoa,XUE Xiu-hengb,LI Pei-yinga,WANG Ju-hua.Comparison of four primary culture methods for mouse intestinal epithelial cells[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2013,41(5):25-31.
Authors:SUN Xiu-meia  CHENG Fanb  LIU Weia  SUN Taoa  XUE Xiu-hengb  LI Pei-yinga  WANG Ju-hua
Institution:a(a College of Animal Technology,b College of Tea&Food Technology,Anhui Agriculture University,Hefei,Anhui 230036,China)
Abstract:
Keywords:mouse  mouse intestinal epithelial cells  primary culture  tissue fractional cultivation  enzymology fractional cultivation
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