RHO1基因的HIGS表达载体构建及转基因水稻的抗病性分析 |
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引用本文: | 唐 喆,张 强,项 萍.RHO1基因的HIGS表达载体构建及转基因水稻的抗病性分析[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2018,46(8):39-46. |
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作者姓名: | 唐 喆 张 强 项 萍 |
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作者单位: | 西北农林科技大学植物保护学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金青年项目(31301607);国家重点基础研究发展计划(“973”计划)项目(2013CB127700) |
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摘 要: | 【目的】使用Gateway技术构建稻瘟菌RHO1基因寄主诱导的基因沉默(HIGS)表达载体,将其转化入水稻后,观察稻瘟菌对转基因水稻的致病力。【方法】利用PCR技术从稻瘟菌cDNA扩增RHO1基因,通过Gateway技术构建pBDL03-RHO1载体,电转化进入农杆菌AGL1;以水稻日本晴为材料,通过农杆菌介导的转化方法获得转基因水稻植株,并对其接种稻瘟菌,分析转基因水稻对稻瘟菌抗性。【结果】通过PCR扩增获得了RHO1基因片段,利用BP反应构建了入门载体pDONR 221-RHO1,采用LR反应构建了HIGS表达载体pBDL03-RHO1。通过农杆菌介导的转基因方法将HIGS载体转入了水稻中,并利用mCherry红色荧光观察和PCR扩增验证了转基因植株构建成功。接种试验结果表明,HIGS转基因植株对稻瘟菌的抗性提高。【结论】利用Gateway技术可以简单快速构建HIGS表达载体,表达RHO1的转基因水稻抗病性提高,表明RHO1介导的HIGS在水稻-稻瘟菌互作过程中可以发挥作用。
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关 键 词: | 稻瘟菌 寄主诱导的基因沉默 水稻 抗病性 Gateway技术 |
收稿时间: | 2017/5/19 0:00:00 |
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