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生防链霉菌gCLA4遗传转化体系的建立与优化
引用本文:徐萌萌,张 红,何 姣,等.生防链霉菌gCLA4遗传转化体系的建立与优化[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2016,44(10):121-125.
作者姓名:徐萌萌  张 红  何 姣  
作者单位:西北农林科技大学 生命科学学院;旱区作物逆境生物学国家重点实验室,西北农林科技大学 理学院;旱区作物逆境生物学国家重点实验室,西北农林科技大学 生命科学学院;旱区作物逆境生物学国家重点实验室
基金项目:国家自然科学基金项目(31101476,31171796);陕西省科学技术研究发展计划项目(2013K01-45);杨凌示范区科技计划项目(2014NY-41)
摘    要:【目的】建立生防菌淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendularectus)gCLA4的遗传转化体系,为定向改造基因、提高基因表达水平及其生防分子机制研究奠定基础。【方法】以具有安普霉素(Apramycin)抗性基因标记的整合型质粒pSET152为出发质粒,Escherichia coli ET12567(pUZ8002,pSET152)为供体,淡紫灰链霉菌gCLA4为受体进行接合转移试验,并对影响接合效率的培养基、热激温度、接合转移时间和筛选转化子培养基等因素进行优化。【结果】成功地将质粒pSET152转入到了生防链霉菌gCLA4中,明确了可用于筛选链霉菌gCLA4转化子的抗生素为安普霉素或四环素;链霉菌gCLA4孢子50℃热激时转化效率较高,接合效率在16,18,20h下没有明显差异,MS培养基作为接合转移培养基时转化效率最高,接合产物涂布到高氏一号抗性培养基上进行阳性转化子筛选的效果最好。【结论】建立了生防链霉菌gCLA4的遗传转化优化体系。

关 键 词:生防链霉菌gCLA4菌株  接合转移  遗传转化  质粒pSET152
收稿时间:2015/3/11 0:00:00

Establishment and optimization of genetic transformation system for bio-control Streptomyces lavendularectus gCLA4
XU Mengmeng,ZHANG Hong and HE Jiao,et al.Establishment and optimization of genetic transformation system for bio-control Streptomyces lavendularectus gCLA4[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2016,44(10):121-125.
Authors:XU Mengmeng  ZHANG Hong and HE Jiao  
Abstract:
Keywords:
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