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猪α干扰素在大肠杆菌中的表达及抗病毒活性检测
引用本文:崔保安,陈红英,张素梅.猪α干扰素在大肠杆菌中的表达及抗病毒活性检测[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2008,36(4):42-46.
作者姓名:崔保安  陈红英  张素梅
作者单位:1. 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002
2. 河南省兽药监察所,河南,郑州,450008
3. 河南省动物卫生监督所,河南,郑州,450008
摘    要:【目的】利用基因工程技术寻求能够高效、稳定表达猪α干扰素,且表达产物易于纯化的表达系统。【方法】以含猪α干扰素(IFN-α)基因的重组质粒pGEM-T-IFN-α为模板,PCR扩增猪α干扰素基因。将IFN-α片段定向插入原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达质粒pGEX-IFN-α,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下表达可溶性的融合蛋白(GST-IFN-α)。【结果】SDS-PAGE可检测到相对分子质量约为45 ku的GST-IFN-α,Westernblot证实GST-IFN-α能与猪IFN-α单克隆抗体发生特异性反应。重组猪α干扰素经谷胱苷肽Sepharose-4B亲和柱层析纯化后,在Vero细胞上抗水泡性口炎病毒的活性为2.24×103U/mg。【结论】建立的表达系统能够表达重组猪α干扰素,表达的重组猪α干扰素具有一定的生物活性。

关 键 词:猪α干扰素  原核表达  抗病毒活性
文章编号:1671-9387(2008)04-0042-05
收稿时间:5/3/2007 12:00:00 AM
修稿时间:2007年5月3日

Expression of porcine interferon-α in Escherichia coli and detection for its antiviral activity
CUI Bao-an,CHEN Hong-ying,ZHANG Su-mei,LIU Zhan-tong,JIN Xi-xin,SONG Ling-yun.Expression of porcine interferon-α in Escherichia coli and detection for its antiviral activity[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2008,36(4):42-46.
Authors:CUI Bao-an  CHEN Hong-ying  ZHANG Su-mei  LIU Zhan-tong  JIN Xi-xin  SONG Ling-yun
Institution:1(1 College of Animal Husbandry and Veterinary,Henan Agricultural University,Zhengzhou,Henan 450002,China;2 Henan Institute of Veterinary Drug Control,Zhengzhou,Henan 450008,China;3 Henan Institute of Animal Health Control,Zhengzhou,Henan 450008,China)
Abstract:
Keywords:porcine interferon-alpha  prokaryotic expression  anitviral activity
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