| 降解布洛芬克隆菌株转座子插入突变体的构建 |
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| 引用本文： | 卫亚红,段 敏,向照举,等.降解布洛芬克隆菌株转座子插入突变体的构建[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2016,44(4):135-141. |
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| 作者姓名： | 卫亚红 段 敏 向照举 等 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 生命科学学院，旱区作物逆境生物学国家重点实验室，旱区生物质能研究中心,西北农林科技大学 生命科学学院,陕西师范大学 生命科学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(31070453)；陕西省国际科技合作项目(2013KW-29)；西北农林科技大学科技创新专项(QN2011113)；西北农林科技大学国际科技合作项目(A213021311) |
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| 摘 要： | 【目的】敲除布洛芬福斯质粒文库克隆菌株4F6中的邻苯二酚-2,3-双加氧酶基因(C23O),构建其Tn5插入突变体,为布洛芬降解调节因子的深入研究奠定基础。【方法】以构建好的3G7Tn5突变体菌株为基础,借助pKD46质粒的λ-red同源重组酶,将转座子Tn5从菌株3G7中电击转化至4F6,消除pKD46质粒,敲除4F6菌株中的C23O基因,测定出发菌株3G7、4F6及Tn5插入突变体菌株3G7-G9、3G7-H5、4F6-G9和4F6-H5间位苯环的裂解活性。【结果】42℃条件下消除了Tn5插入突变体受体菌4F6中的pKD46质粒,构建了4F6-G9和4F6-H5突变体。Tn5转座子插入突变株3G7-G9、3G7-H5、4F6-G9和4F6-H5的间位苯环裂解活性无显著差异;菌株4F6的间位苯环裂解活性虽明显高于菌株3G7,但也仅有1个C23O基因,其活性差异可能与布洛芬降解调控因子有关。【结论】提供了一种简便有效定位并敲除C23O基因的方法。
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| 关 键 词： | 可降解布洛芬福斯质粒 Tn5突变体 基因敲除 |
| 收稿时间： | 2014/8/21 0:00:00 |
Construction of transposon insertion mutants for ibuprofen degradable cloning strains from Fosmid Library |
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| WEI Yahong,DUAN Min and XIANG Zhaoju,et al.Construction of transposon insertion mutants for ibuprofen degradable cloning strains from Fosmid Library[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2016,44(4):135-141. |
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| Authors: | WEI Yahong DUAN Min and XIANG Zhaoju |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ibuprofen degradable fosmid Tn5 mutants gene knockout |
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