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鸡β-防御素3(Gal-3)基因的克隆、表达及抑菌活性研究
引用本文:付连军,刘 磊,张 磊.鸡β-防御素3(Gal-3)基因的克隆、表达及抑菌活性研究[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2013,41(2):19-24.
作者姓名:付连军  刘 磊  张 磊
作者单位:吉林农业科技学院 动物医学学院;吉林医药学院 检验学院;吉林医药学院 检验学院
基金项目:吉林省科技发展计划项目(20090244);吉林省教育厅“十一五”科学技术研究项目(2009297)
摘    要:【目的】克隆和表达鸡β-防御素3(Gal-3)基因,并对其抑菌活性进行研究,为寻找替代抗生素的抗菌肽提供试验依据。【方法】利用RT-PCR方法,从鸡心脏中分离并克隆了鸡Gal-3基因,将其与分子伴侣基因SUMO相融合,再将该融合基因与原核表达载体pET-20b连接后转化至BL21(DE3)宿主细胞中,经IPTG诱导后,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析;最后,对Gal-3融合蛋白进行纯化,并对表达产物进行体外抑菌试验。【结果】通过RT-PCR扩增获得了约240bp的鸡Gal-3基因,经IPTG诱导获得约26ku的蛋白。IPTG在终浓度为0.6mmol/L,33℃诱导4h,诱导时菌体A600为0.6,蛋白表达量最高,且多数以可溶形式存在,33℃上清中的蛋白含量比37℃上清高。纯化的蛋白对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌均有明显的抑菌活性。【结论】成功克隆并表达了鸡Gal-3基因,其原核表达产物对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌具有一定的抑菌活性。

关 键 词:防御素  Gal-3基因  原核表达  抑菌活性
收稿时间:2012/6/10 0:00:00

Cloning,expression and antibacterial activity of chicken Gal-3 gene
FU Lian-jun,LIU Lei,ZHANG Lei,HE Yuan-xin,MO Suo,WANG Hui-yan.Cloning,expression and antibacterial activity of chicken Gal-3 gene[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2013,41(2):19-24.
Authors:FU Lian-jun  LIU Lei  ZHANG Lei  HE Yuan-xin  MO Suo  WANG Hui-yan
Institution:1,2,3(1 Institute of Animal Medicine,Jilin Agricultural Science and Technology College,Jilin,Jilin 132101,China;2 Laboratory Medical College,Jilin Medical College,Jilin,Jilin 132013,China;3 Ministry of Education Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development,Jilin Agricultural University,Changchun,Jilin 130118,China)
Abstract:
Keywords:defensin  Gal-3 gene  prokaryotic expression  antimicrobial activity
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