利用甘蓝游离小孢子不定芽叶片再生DH植株技术研究

【目的】探索一种能将有限的DH株快速扩繁的植株再生技术，扩大DH株数量以提高育种效率。【方法】以甘蓝小孢子胚状体不定芽叶片为试材，MS为基础培养基，分别添加不同质量浓度的6-BA(1.0，2.0，3.0，4.0 mg/L)和NAA(0.05，0.1，0.2，0.4 mg/L)，筛选出最优质量浓度组合；在6-BA和NAA最优质量浓度组合上，继续添加不同质量浓度的GA-3(0.5，1.0，1.5，2.0 mg/L)，比较筛选小孢子不定芽叶片的最佳再生方法。最后，在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L不定芽诱导培养基上，研究不同生长日龄DH株叶片的诱导效果。【结果】 在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L中，不定芽再生频率最高，为64.29%，分化系数4.03；添加6-BA、NAA和 GA-3 3种激素，对不定芽再生频率促进作用更大，其中MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA-3 1.5 mg/L诱导效率最高，不定芽再生频率达到了80.36%，分化系数为4.15。当DH株叶片生长日龄为25 d时，不定芽再生频率相对最大，达到68.76%，分化系数为3.62，35 d后诱导效果下降。【结论】 甘蓝DH株叶片诱导植株再生的适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L+GA-3 1.5 mg/L；以生长日龄为25 d左右的甘蓝DH株叶片作为外植体诱导植株再生效果较好。

Study on plantlet regeneration technique of DH lines with leaf of adventitious buds from isolated microspore culture in cabbage (Brassica oleracea L.)